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大肠杆菌UvrB基因的克隆、表达与功能研究 下载:72 浏览:484

方佳炜1 张梦2 杨一鸣1 叶依杨1 王中山3 《生物技术研究》 2020年4期

摘要:
在大肠杆菌表达系统表达UvrB蛋白,优化其表达和纯化的条件,并初步研究其对抗紫外线伤害的功能。[方法]克隆大肠杆菌MG1655菌株UvrB编码序列,采用酶切连接的方法构建表达载体p Waldo-GFP-UvrB,并转入BL21(DE3)表达菌株诱导蛋白质表达,采用Ni-NTA亲和层析以及分子筛层析的方法纯化蛋白质,采用紫外光刺激的方法研究其细胞内功能。[结果]成功构建UvrB表达载体,获得UvrB在BL21(DE3)中重组菌株,其表达条件为22℃,0. 2 mmol/L IPTG诱导20 h,UvrB以可溶蛋白的形式存在。SDS-PAGE结果显示UvrB蛋白质分子量约76 k Da与预期相符;经纯化后UvrB蛋白质得率约为0. 6 mg/L培养基,纯度> 85%,为其进一步研究奠定了基础。[结论]研究克隆并构建了大肠杆菌UvrB蛋白的原核表达体系,优化了其纯化方案,得到纯度> 85%的可溶UvrB蛋白质,为进一步研究UvrB蛋白质功能奠定了基础。

提高建筑工程管理及施工质量控制的有效策略 下载:190 浏览:1938

依杨 《建筑与工程管理》 2022年5期

摘要:
近年来,各地多发的建筑工程安全事故引起了社会各界的广泛关注,人们在日益增长的对建筑工程数量的需求之外,对建筑工程的管理质量与施工质量提出了更高层次的要求。为更好地满足社会发展与人们生产生活对建筑工程质效的需求,分析当前建筑工程管理与施工质量控制现状,提出其发展所面临的各项问题,最终结合实际情况与未来发展趋势,提出有效的发展方案与改进措施。

建筑工程管理的制约因素及应对措施 下载:189 浏览:1905

依杨 《建筑与工程管理》 2022年4期

摘要:
我国近几年建筑工程数量不断增多,同时,在管理上面也增加了更加复杂的内容,由于在管理过程中存在的内因和外因,所以,建筑工程管理项目难度加大,为了确保建筑工程的质量,需要管理人员分析存在的问题,采取有效措施来提升建筑管理水平,保证建筑企业长期健康发展。本文首先分析了建筑工程管理的重要性,并概述了建筑工程管理的制约因素,最后提出了解决当前建筑工程管理制约问题的应对方案。
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