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壳寡糖改善珍珠龙胆石斑鱼非特异性免疫能力的机制
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摘要:
为研究壳寡糖(OCS)对珍珠龙胆石斑鱼非特异性免疫能力的影响及作用机制，实验通过在基础实验饲料中分别添加0(对照组)、200、400和800 mg/kg的壳寡糖投喂珍珠龙胆石斑鱼4周，综合分析壳寡糖对石斑鱼免疫调控作用的影响。实验首先检测了壳寡糖对鱼体内免疫及抗菌相关酶活性的影响。结果显示，投喂壳寡糖后显著提高珍珠龙胆石斑鱼谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、溶菌酶(LZM)、过氧化氢酶(CAT)、碱性磷酸酶(AKP)、谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)的活性。其次，添加壳寡糖可显著提高珍珠龙胆石斑鱼头肾占比。为进一步探究壳寡糖对珍珠龙胆石斑鱼的免疫调控作用，本实验通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测珍珠龙胆石斑鱼头肾中免疫基因的表达情况。结果显示，壳寡糖对炎症具有双向调控作用，低剂量壳寡糖会激活炎症因子基因IL-6和IL-1β的表达，而高剂量壳寡糖会通过NF-κB途径抑制IL-6、IL-1β和TNF-α的表达。最后，通过哈维氏弧菌攻毒实验检测了壳寡糖对珍珠龙胆石斑鱼的免疫保护作用，结果显示，壳寡糖能通过NF-κB细胞通路抑制炎症因子mRNA的表达，同时显著抑制了细胞凋亡相关基因的表达。研究表明，壳寡糖的添加可促进珍珠龙胆石斑鱼的生长，提高其非特异性免疫，具有一定的免疫保护作用。本研究为壳寡糖在水产养殖中的应用提供理论参考，同时为珍珠龙胆石斑鱼的疫病防控提供依据。
酶解海洋壳寡糖和褐藻寡糖对鲢鱼糜热稳定性、化学作用力及蛋白质结构的影响
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摘要:
为研究添加不同质量分数1.0%、0.5%的酶解壳寡糖(chitooligosaccharides, CO)和酶解褐藻寡糖(alginate oligosaccharides, AO)对鲢Hypophthalmichthys molitrix鲢鱼糜品质的影响，使用差示扫描量热仪(DSC)和酶标仪对鲢鱼糜冷冻稳定性、冰点、热稳定性和化学作用力进行分析，采用傅立叶变换红外光谱、内源荧光光谱及紫外吸收光谱对肌原纤维蛋白(MP)结构进行了测定。结果表明：鲢鱼糜中添加1.0%和0.5%的CO和AO后，CO组鲢鱼糜比AO组有更好的冷冻稳定性，且0.5%CO组效果为佳；CO组鲢鱼糜的冰点与CO含量呈正相关，而AO组呈负相关，CO组鲢鱼糜的可冻结水含量降低，AO组鲢鱼糜可冻结水含量升高，均与添加的寡糖含量呈正相关；AO和CO组鲢鱼糜热稳定性提高，且经1.0%含量寡糖修饰后的鲢鱼糜样品热稳定性较强；0.5%含量寡糖修饰对鲢鱼糜蛋白质离子键具有保护作用，但寡糖修饰对蛋白质的氢键、疏水相互作用和二硫键含量均无显著影响(P>0.05);两种寡糖与肌原纤维蛋白之间均为静电相互作用，且改变了MP的二级结构；荧光光谱分析显示，CO更容易使色氨酸(Trp)埋藏于疏水基团中；紫外吸收光谱分析发现，经寡糖修饰后酪氨酸(Tyr)易暴露。研究表明，两种寡糖均改变了鲢鱼糜的性质与肌原纤维蛋白的结构，1.0%组有较好的热稳定性，其中CO能更好地维持鲢鱼糜的冷冻稳定性组。
裙带菜岩藻聚糖硫酸酯酸解工艺优化及降解产物对巨噬细胞的抗炎活性
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摘要:
为了有效降解裙带菜Undaria pinnatifida Suringar岩藻聚糖硫酸酯，并探究其降解产物的抗炎活性，以复合酶解法提取的裙带菜岩藻聚糖硫酸酯(fucoidan)为原料，利用酸解法制备裙带菜岩藻聚糖硫酸酯降解产物，采用薄层色谱法(TLC)检测降解产物聚合度，优化酸解工艺条件，利用膜分离技术获得不同分子量段的降解产物，并检测了各段降解产物对小鼠巨噬细胞的抗炎活性。结果表明：通过薄层色谱检测，确定酸解温度95℃、pH2、水解4 h为酸解裙带菜岩藻聚糖硫酸酯的优化条件；膜分离处理后可得到F1(相对分子质量400～1 000)、F2(1 000～3 500)、F3(3 500～5 000)、F4(5 000～10 000)、F5(10 000以上) 5种不同分子量段的岩藻聚糖硫酸酯降解产物，5种降解产物均能减少RAW264.7细胞NO、1L-1β、1L-6、1L-10和TNF-α的释放量；低分子量段组分(F1、F2)抗炎效果最为显著，其中组分F1抗炎效果最好。研究表明，经优化酸解工艺制备的裙带菜岩藻聚糖硫酸酯降解产物具有一定的抗炎效果，且分子量越低的降解产物抗炎效果越好，裙带菜岩藻聚糖硫酸酯寡糖比多糖具有更好的抗炎活性。
