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发酵秸秆多糖的分离纯化及抗氧化活性测定 下载：28 浏览：491

冯炘 李艳红 解玉红 《中国食品与营养》 2019年12期

摘要:
以玉米秸秆为原料,通过微生物发酵得到秸秆多糖,对分离纯化后的秸秆多糖进行了结构、组成及抗氧化性测定,进一步了解了秸秆多糖的理化性质。玉米秸秆通过微生物发酵、离心、去蛋白、醇沉等步骤得到粗多糖(Corn Stalk Polysaccharides,CSP),粗多糖经DEAE-Cellulose 52纤维素柱和Sephadex G-100凝胶柱进行分离纯化,得到CSP1、CSP3、CSP5 3种组分的多糖。对得到的多糖进行电镜扫描(SEM)、傅里叶变换红外光谱分析(FT-IR)、气相色谱(GC)分析及抗氧化性测定。FT-IR结果显示纯化后的3种多糖均主要为吡喃糖,GC结果表明木糖和阿拉伯糖为其主要组成成分,且通过抗氧化性测定可知CSP5有较强的DPPH自由基清除能力,清除率可达到84.86%。

邳州地区霉腐蒜头致病性真菌的分离鉴定 下载：81 浏览：484

何祎范 龚健 吴彩娥 田方 《生物技术研究》 2019年8期

摘要:
分离鉴定江苏邳州地区霉腐蒜头的致病真菌,为防控该地区蒜头腐败,延长蒜头贮藏期提供理论指导。[方法]对江苏邳州霉腐大蒜的腐败真菌采用点接法培养分离纯化,科赫氏法则和粘片法对蒜头霉腐微生物菌落形态、菌丝显微结构进行观察,并进行分子生物学鉴定。[结果]分离得到7株菌株,确定病原菌A为芽枝霉菌(Cladosporium cladosporioides),B为黑霉菌(Cladosporium cladosporioide),C为鲜绿青霉菌(Penicillium verrucosum),D为白腐菌(Trametes versicolor),E、G为芽枝状枝孢霉菌(Cladosporium cladosporioide),F为青霉菌(Penicillium chrysogenum),H为烟曲霉菌(Aspergillus funigatus)。[结论]导致江苏邳州地区大蒜霉腐的真菌主要是芽枝霉菌(Cladosporium cladosporioides)、黑霉菌(Cladosporium cladosporioide)、鲜绿青霉菌(Penicillium verrucosum)、白腐菌(Trametes versicolor)、芽枝状枝孢霉菌(Cladosporium cladosporioide)、青霉菌(Penicillium chrysogenum)、烟曲霉菌(Aspergillus funigatus)。

高分子多孔微球产品的制备及其在类病毒颗粒分离纯化中的应用 下载：92 浏览：507

那向明1,2 周炜清1 李娟1 苏志国1 马光辉1 《应用化学学报》 2018年2期

摘要:
高分子多孔微球在医药领域的分离纯化中应用广泛,是重要的化工产品。高分子多孔微球的形成是一个复杂的过程,利用聚合物与有机溶剂致孔剂的相分离,可得到小于100nm孔径的多孔微球；而水和疏水性聚合物之间相分离程度远大于有机溶剂与聚合物间的相分离程度,因此可获得大于100nm孔径的多孔微球。针对不同应用领域选择不同的方法,设计并制备出合理的微球结构,对多孔微球的实际应用十分关键。本综述介绍了纳孔、介孔、大孔微球产品的制备方法悬浮聚合和种子聚合法,重点介绍本课题组制备超大孔微球的方法——反胶团溶胀法和W/O/W复乳法,上述两种方法解决了常规方法难以制备大孔径微球产品的问题,拓展了多孔微球在类病毒颗粒等大尺寸蛋白分离纯化领域的应用。在此基础上,以HB-VLPs为模型对比了不同孔径微球对类病毒颗粒吸附量、回收率、结构、以及纯化效果的差异,揭示超大孔微球产品在类病毒颗粒分离纯化中的优势。

美洲大蠊抗菌肽AMPPA13的表达及纯化 下载：86 浏览：502

张文博1 高洁1 麻锦楠2 李午佼2 沈咏梅2 张修月1 岳碧松1 《生物技术研究》 2018年3期

摘要:
预测美洲大蠊新的抗菌肽基因,构建原核表达体系并纯化表达产物。[方法]通过生物信息学方法,预测分析出潜在的美洲大蠊抗菌肽。构建pET32a重组质粒,优化诱导表达条件,通过亲和层析,分子筛等手段获得纯化的抗菌肽,并进行Western Blot鉴定。[结果]预测出美洲大蠊新的抗菌肽基因AMPPA13,成功构建重组质粒pET32aAMPPA13。优化诱导表达条件得最佳IPTG浓度为0.1 mmol/L,最佳诱导时间为4 h,最佳诱导温度为37℃。纯化后AMPPA13浓度为268μg/m L。[结论]克隆出美洲大蠊抗菌肽基因,并成功构建原核表达体系,得到1 m L纯化的AMPPA13,经Western Blot鉴定,表达产物正确。

南极磷虾主要过敏原的分离纯化及性质研究 下载：78 浏览：462

林娜1 马德蓉1，2 刘志东1 倪玲1 段蕊2 张俊杰2 《水产研究进展》 2022年5期

摘要:
为了探究南极磷虾致敏问题，从南极磷虾中筛选、鉴定、分离纯化其主要过敏原，并对过敏原的性质进行研究，实验通过缓冲盐溶液提取南极磷虾蛋白；采用SDS-PAGE和Western blot(WB)筛选南极磷虾过敏原；使用高效液相色谱-串联质谱鉴定过敏蛋白；通过等电点沉淀、硫酸铵盐析、阴离子交换柱层析分离纯化过敏原；采用SDS-PAGE及WB分析南极磷虾主要过敏原的耐热性及对模拟胃肠液的消化稳定性。结果显示，南极磷虾肌浆蛋白(SP)和肌原纤维蛋白(MF)电泳条带丰富且分子量范围广。南极磷虾蛋白与虾蟹过敏患者血清能发生免疫反应，其中至少有4个蛋白条带发生了阳性反应；免疫反应最强烈的蛋白分子量约为35ku，能够被所有的患者血清识别，经液质联用鉴定此过敏蛋白为南极磷虾原肌球蛋白(TM)。硫酸铵分级盐析纯化TM的最佳饱和度为50%；分离纯化后得到了纯度较高的TM，其等电点为4.4，热稳定性好，能与虾蟹过敏患者血清发生强烈的免疫反应。TM随着模拟胃液消化时间的延长，主条带分子量逐渐降低，最后稳定在33ku左右，并且分子量为15和12ku的降解片段含量逐渐增多且稳定存在；这些降解条带仍然能与过敏患者血清发生较强的免疫反应。随着模拟肠液消化时间的延长，TM原始片段逐渐减少直至消失，最后完全降解成分子量更小的多肽；TM经肠液消化后其降解产物免疫活性大大降低。研究表明，南极磷虾中存在过敏原，TM是其最主要的过敏原，且具有免疫反应性。TM还具备了过敏原的一般特性，比如耐高温、耐胃蛋白酶消化、对胰蛋白酶消化部分稳定。研究结果对于阐明南极磷虾潜在致敏问题的预警和防控具有现实意义，也为南极磷虾加工利用及过敏原消减技术构建提供基础信息。

铜藻褐藻聚糖硫酸酯的分离纯化、结构组成及保肝护肝作用 下载：48 浏览：313

卓丹琪1 张雪楠1 李雨晴1 刘诗萌1 任丹丹1,2 何云海1,2 汪秋宽1,2 《中国水产学报》 2022年4期

摘要:
为研究铜藻褐藻聚糖硫酸酯的结构组成及保肝护肝作用，以铜藻Sargassum horneri褐藻聚糖硫酸酯（fucoidan）粗品为原料，经DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换柱分离纯化，采用高效液相色谱及红外光谱对粗多糖（TF）及其纯化组分的单糖组成和结构特征进行分析，并建立CCl4诱导的肝脏损伤动物模型，进行各组分的保肝作用试验。结果表明：从铜藻褐藻聚糖硫酸酯粗品分离纯化得到TF1、TF2、TF3、TF4 4个组分，其硫酸基团含量分别为9.62%、11.51%、14.51%和13.62%;单糖组成分析显示，粗多糖主要由岩藻糖（Fuc）、葡萄糖（Glu）、甘露糖（Man）和半乳糖（Gal）组成，各纯化组分的单糖组成含量差异较大；红外光谱分析显示，TF及其纯化组分在1 250 cm-1附近出现强吸收峰，为S=O（硫酸基）的吸收峰，证明TF及其纯化组分均含有硫酸基团，且TF、TF3、TF4的硫酸基主要连接于岩藻糖的C-2或C-3位置，TF1、TF2主要连接于岩藻糖的C-4位置；动物试验显示，灌胃不同剂量TF及其纯化组分，均能显著提高肝损伤小鼠肝脏或血清中SOD、GSH-Px和TNF-α的活性（P<0.05）,显著降低MDA、ALT和AST指标的水平（P<0.05）,肝组织切片显示，肝细胞病变程度较模型组明显减轻。研究表明，铜藻褐藻聚糖硫酸酯粗品经分离纯化得到4个组分，总体上具有显著的抗氧化和保肝护肝作用。
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