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EV71抗原双元植物表达载体构建及生菜瞬时表达 下载：88 浏览：505

罗雯 艾佐佐 刘艳梅 刘旺喜 《生物技术研究》 2018年3期

摘要:
构建EV71 P1和3CD基因的双元植物表达载体,通过农杆菌注射渗透法实现在生菜叶片中的瞬时共表达。[方法]根据Gen Bank序列,设计合成EV71 C4亚型P1和3CD基因,分步克隆入植物表达载体p CAMBIA2301,并转化农杆菌LBA4404。农杆菌注射渗透法对意大利生菜叶片进行遗传转化,固相酶联斑点实验和免疫印迹实验检测感染叶片总蛋白提取物,分析外源基因表达效果。[结果]限制酶切验证获得共表达植物表达载体p CAMBIA2301-P1-3CD。感染叶片的外源基因表达产物中具有抗VP1抗体结合活性的蛋白,其分子量约39 k Da。[结论]成功构建EV71 3CD和P1基因双元植物表达载体,其在意大利生菜叶片中的表达产物具有免疫反应性。为利用植物生物反应器生产抗EV71口服疫苗提供了理论和实验依据。

2015-2017年南宁市手足口病病原学监测结果分析 下载：74 浏览：491

詹鑫婕 农皓 裴建新 杨丞 秦剑秋 《预防医学杂志》 2019年3期

摘要:
目的了解2015-2017年南宁市手足口病病原谱及其流行特征,为其防控提供科学的参考依据。方法采用实时荧光定量PCR对2015-2017年南宁市采集的南宁市手足口病病例标本进行肠道病毒检测,并对病原学检测数据进行整理分析。结果 2015-2017年,共采集手足口病病例标本4 633例,阳性标本3 886例(83. 88%)。其中EV71型、Cox A16型和他类型的EV的构成比分别为31. 29%,14. 59%,54. 12%。南宁市全年均有手足口病病例报告,发病高峰期为每年的3-11月。每年手足口病病毒的型别特征各不相同。病毒核酸检测阳性病例以5岁以下儿童为主(96. 29%),男性病例阳性检出率(85. 49%)高于女性(80. 97%)(χ2=16. 120,P <0. 001)。1 899例重症患者标本和7例死亡病例标本中,重症病例EV71型阳性率为43. 29%,其他肠道病毒阳性率为47. 68%。死亡病例全部为EV71型。结论南宁市手足口病病原谱变化多样,除了EV71和Cox A16型,还应加强对其他肠道病毒的检测。5岁以下儿童,特别是4岁以下的儿童是防控手足口病,防止病程进展为重症、死亡病例的重点关注的人群。

2015-2016年中山市手足口病病原学监测结果分析 下载：96 浏览：526

黄恩妙 师舞阳 姚梓烽 《预防医学杂志》 2018年12期

摘要:
目的了解2015-2016年中山市手足口病病原谱及其流行特征,为其防控提供科学的参考依据。方法 2015-2016年期间对手足口病哨点医院监测病例的标本开展肠道病毒检测,对其结果进行流行病学分析。结果检测1 549份标本,共检出1 225份阳性,检出率为79.08%(1 225/1 549);其中其他肠道病毒(PE)阳性率为49.13%(761/1 549),CA16阳性率为15.75%(244/1 549),EV71阳性率为14.01%(217/1 549),混合感染阳性率为0.19%(3/1 549)。2015年以PE为优势流行株(占66.26%,493/744),全年除2月外病原体阳性率均在较高水平波动,7月达到年度最高峰;2016年上半年以CA16为优势流行株,下半年以PE为优势流行株;全年有2个季节高峰,最高峰为4-7月,次高峰为11-12月。男女间手足口病病毒检出率无统计学差异;病毒核酸检测阳性病例以5岁以下儿童为主。结论手足口病病原体每年优势毒株不同,季节高峰主要与流行的优势毒株有关,应加强病原学监测,并重点关注5岁以下人群。

2015-2016年贵州省手足口病非EV71、非CVA16肠道病毒型别鉴定和分析 下载：94 浏览：484

李俞亭1 杨兴林2 王芳胜1 迟茜文1 郭楚娴1 魏洪1 《预防医学杂志》 2018年10期

摘要:
目的探讨2015-2016年贵州省手足口病非EV71(Enterovirus 71,EV 71)、非CVA16(Coxsackievirus A16,CVA16)肠道病毒株的病原构成及优势型别。方法共收集2015-2016年贵州省儿童手足口病疑似患者肛拭子350例标本,应用实时荧光定量PCR法筛选出非EV71、非CVA16型肠道病毒,采用RT-PCR法扩增病毒VP1区序列,PCR阳性扩增产物进行测序,对测得序列进行型别鉴定并与国内外各型代表株进行核苷酸同源性分析,构建系统进化树。结果从收集到的手足口病疑似患者肛拭子标本中,共分离到21株其他肠道病毒,分别为:CVA5、CVA7、CVA9、CVB3(Coxsackievirus B3,CVB3)、CVB4、E11(Echovirus11,ECHO11)、E17各1株,CVA10、CVB1各2株,CVB5、E7各5株。通过系统发育树揭示,分离到的同型别毒株之间具有同源性,而非同型别的毒株与国内外各代表株之间具有同源性。结论贵州省引起手足口病的非EV71、非CVA16型肠道病毒型别分布较广,包括CVB组,CVA组和ECHO病毒,其中CVB5、E7为非EV71、非CVA16型肠道病毒主要病原体。
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