三种核酸提取方法用于检测血浆EBV-DNA的性能及应用评价
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郑瑜宏
陈岩松
潘建基
林少俊
肖振州
宗井凤
林莺莺
郭巧娟
许元基
陈燕
《国际检验医学》
2018年3期
摘要:
目的评价并比较用于检测血浆EBV-DNA的3种核酸提取方法的分析性能及临床应用价值。方法分别采用硅膜离心柱法、浓缩煮沸裂解法或自动化磁珠吸附法平行提取核酸，并通过实时荧光定量PCR测定EBV-DNA。利用第三方定值参考物质，比较三种方法的检测性能，并配对检测100例NPC患者及100名健康体检者血浆，评估3种方法的临床应用价值。结果 3种方法提取并检测EBV-DNA的正确度、不精密度均符合要求，且对临床样本的测定结果均呈线性相关。但磁珠法的重复性不精密度和中间不精密度较离心柱法与煮沸法均小且稳定(均<3%)；最低检测限(约3.334×10～1 IU/ml)较离心柱法(4.159×10～1 IU/ml)与煮沸法(8.511×10～1 IU/ml)稍灵敏；线性范围(5.4×10～1～5.4×10～5 IU/ml)较煮沸法(5.4×10～2～5.4×10～5 IU/ml)稍宽；抗Hb干扰能力优于煮沸法；而且对NPC样本检测的阳性率及平均病毒载量(95%，8.342×10～3 IU/ml)均显著高于离心柱法(84%，4.707×10～3IU/ml)与煮沸法(78%，2.571×10～3 IU/ml)(P均<0.05)。结论采用自动化磁珠吸附法提取检测血浆EBV-DNA可以实现更好的检测性能，并具备更高的临床应用价值。
