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黄瓜Cu/Zn-SOD基因克隆及可溶性表达和纯化 下载：81 浏览：490

陈梦瑶 冯超越 南天豪 陈星辉 冯雨彤 朱振洪 《生物技术研究》 2019年6期

摘要:
克隆黄瓜Cu/Zn-SOD基因,并利用大肠杆菌进行可溶性表达、纯化及活性测定。[方法]采用Trizol法提取黄瓜表皮的总RNA,然后设计特异性引物,通过RT-PCR技术克隆获得黄瓜Cu/Zn-SOD基因。该基因与p GEX2T载体相连后,转化大肠杆菌BL21(DE3),摸索可溶性表达方法。利用GST亲和层析方法纯化目标蛋白,SOD酶活性测定采用邻苯三酚法。[结果]成功地克隆了全长为459 bp的黄瓜Cu/Zn-SOD基因,编码152个氨基酸。Protein Blast分析表明其结构域中分别包含Cu2+、Zn2+结合位点,为典型的Cu/Zn-SOD酶。目标蛋白可溶性表达条件是16℃、0. 1 mmol/L IPTG诱导20 h。SDS-PAGE分析表明GST亲和层析成功地获得重组黄瓜Cu/Zn-SOD。活性测定表明两次纯化的蛋白样品SOD酶活力分别为2 328. 9 U/m L、2 144. 7 U/m L。[结论]从黄瓜表皮中克隆获得Cu/Zn-SOD基因,该基因在大肠杆菌系统中获得可溶性表达,纯化后的重组蛋白具有较高的SOD酶活力。

近自然杉木林经营对土壤微生物量碳氮特征的影响 下载：63 浏览：352

石丽娜 林开敏 陈梦瑶 许诺 吴培培 刘圣恩 《土壤研究》 2018年6期

摘要:
在福建农林大学西芹教学林场，比较不同近自然杉木林经营模式(老龄林、萌芽林)与对照(91年二代杉木人工林(炼山)、93年二代杉木人工林(不炼山)、天然林)的土壤微生物量碳氮(MBC、MBN)含量的差异。结果表明:近自然杉木林经营模式(老龄林、萌芽林)和天然林的各层次土壤MBC、MBN含量及其占土壤全碳(TC)和全氮(TN)的比例均高于91年二代杉木人工林和93年二代杉木人工林；土壤MBC含量与土壤MBN含量呈显著正相关；土壤MBC/MBN除在0～10 cm土层，91年二代杉木人工林略高于老龄林外，其它土层均以老龄林最高；从土壤的垂直分布特征来看，5种模式的各层次土壤MBC、MBN含量大小依次均为0～10 cm>10～20 cm>20～40 cm>40～60 cm，即呈现出土壤MBC、MBN含量随土层的加深而降低的趋势。说明近自然杉木林经营模式(老龄林、萌芽林)更有利于土壤微生物的繁殖与生长，具有较高的土壤肥力。
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