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Annexin V-FITC/DAPI细胞凋亡检测法 下载:81 浏览:516

刘钰妮1 王世恩1 汪湘1 任雪1 夏燕2 孙鹏3 曹春雨1 《生物技术研究》 2020年10期

摘要:
建立新的荧光染料DAPI与FITC标记Annexin V联合的细胞凋亡流式细胞术检测方法,以用于具有橙红色荧光的药物处理细胞的流式细胞术凋亡检测。[方法]以倒置荧光显微镜成像和流式细胞仪分别检测不同浓度DAPI对活和死细胞的标记作用。以荧光酶标仪检测不同浓度DAPI处理细胞的荧光信号,并进行相关性分析。以流式细胞术比较Annexin V-FITC/DAPI双染法与Annexin V-FITC/PI双染法对无色和含红/橙色荧光药物导致的细胞凋亡。[结果]DAPI标记可用于区分死细胞和活细胞,DAPI标记死细胞的荧光信号和DAPI的浓度呈线性正相关。Annexin V-FITC/DAPI双染法与Annexin V-FITC/PI双染法相比,二者对不含红橙色荧光药物诱导的多种肿瘤细胞的凋亡检测结果无显著差异。与Annexin V-FITC/PI双染法相比,Annexin V-FITC/DAPI双染法可有效避免药物自身荧光与PI通道重合导致的流式检测干扰。[结论]成功建立了新的Annexin V-FITC/DAPI双染法用于细胞凋亡的流式细胞术检测,该方法能够避免具有红、橙色荧光基团的药物对的干扰检测凋亡。

DZNep诱导HL-60细胞凋亡和生长抑制 下载:78 浏览:498

李倩1 王清1 杨建林1 夏燕2 王艳林1 曹春雨1,2 《生物技术研究》 2018年12期

摘要:
研究S-腺苷同型半胱氨酸水解酶抑制剂DZNep(3-Deazaneplanocin A)对人早幼粒白血病细胞HL-60增殖的影响。[方法]细胞计数法分析DZNep(10~500 nmol/L)处理对HL-60细胞增殖的影响;以DNA片段化、Annexin-V/PI法和线粒体膜电位法检测DZNep处理对HL-60细胞凋亡的影响。Western Blot检测细胞凋亡相关基因Bax和细胞色素C的表达。[结果]50 nmol/L DZNep对HL-60细胞的24、48、72h增殖抑制率达18%、44.5%、81.7%。Annexin-V/PI法显示DZNep能诱导HL-60细胞发生剂量依赖性的细胞凋亡。进一步研究发现,DZNep(50nmol/L)处理24 h诱导23.8%的HL-60细胞发生线粒体途径介导的细胞凋亡,表现为细胞DNA片段化、线粒体膜电位下降和Bax基因表达上调,同时伴有细胞浆内细胞色素C增加。[结论]DZNep能在较低浓度下抑制HL-60细胞增殖并通过激发线粒体凋亡途径诱导HL-60细胞凋亡,具有抗人早幼粒细胞白血病治疗的潜在应用前景。

IL-17、IL-22和IL-10在支气管哮喘患儿外周血单个核细胞中的表达及意义 下载:97 浏览:516

陆光辉1 褚志华1 周发为1 杨年安2 杨洁1 王姣平1 曾守逵1 《国际检验医学》 2019年3期

摘要:
目的探讨白细胞介素(IL)-17、IL-22和IL-10在支气管哮喘患儿外周血单个核细胞中的表达及意义。方法选取75例哮喘患儿,根据病情分为发作组(41例)和缓解组(34例),以体检健康儿童40名作为正常对照组。分离所有对象的外周血单个核细胞,分别采用实时定量聚合酶链反应(PCR)及免疫印迹法检测外周血单个核细胞中IL-17、IL-22和IL-10基因及蛋白的表达,同时检测所有对象的肺功能[第1秒用力呼气量(FEV1)、FEV1/用力肺活量(FVC)比值]。采用Pearson相关分析评估各项目间的相关性。结果发作组FEV1和FEV1/FVC比值均低于缓解组和正常对照组(P<0.05),且缓解组低于正常对照组(P<0.05)。发作组外周血单个核细胞中IL-17、IL-22 mRNA和蛋白的相对表达量均高于缓解组和正常对照组(P<0.05),且缓解组高于正常对照组(P<0.05);而IL-10 mRNA和蛋白的相对表达量均低于缓解组和正常对照组(P<0.05),且缓解组低于正常对照组(P<0.05)。哮喘患儿外周血单个核细胞中IL-17、IL-22 mRNA和蛋白的相对表达量与IL-10 mRNA和蛋白的相对表达量、FEV1、FEV1/FVC比值均呈负相关(P<0.05),IL-10 mRNA和蛋白的相对表达量与FEV1、FEV1/FVC比值均呈正相关(P<0.05)。结论哮喘患儿外周血单个核细胞中IL-17、IL-22表达上调,而IL-10表达下调,且与患儿病情有关,提示辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)比例失调可能参与了哮喘发病。

风湿性疾病的中医治疗策略 下载:265 浏览:2509

秦灿 《中医研究杂志》 2022年6期

摘要:
风湿性疾病是临床常见疾病类型之一,中医治疗该疾病具有较为丰富的经验和方法。中医治疗风湿性疾病的策略包括草药熏洗、针灸、拔罐、艾灸等多种疗法,这些疗法旨在疏通经络、祛湿散寒、活血化瘀、舒筋活络,从而缓解疼痛、改善关节功能和提高患者的生活质量。本文将系统性探讨风湿性疾病的中医治疗策略,旨在为临床实践提供更多的参考和借鉴。

风湿性疾病的中医治疗策略 下载:192 浏览:736

秦灿 《中医研究杂志》 2024年1期

摘要:
风湿性疾病是临床常见疾病类型之一,中医治疗该疾病具有较为丰富的经验和方法。中医治疗风湿性疾病的策略包括草药熏洗、针灸、拔罐、艾灸等多种疗法,这些疗法旨在疏通经络、祛湿散寒、活血化瘀、舒筋活络,从而缓解疼痛、改善关节功能和提高患者的生活质量。本文将系统性探讨风湿性疾病的中医治疗策略,旨在为临床实践提供更多的参考和借鉴。
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