引言:与常规西药相比,中药材及中成药更容易出现假冒伪劣的情况。显微鉴别作为中药传统鉴定四大方法之一,对中药的质量鉴定有着重要的意义。显微鉴别是利用显微镜对药材或饮片的切片、粉末、解离组织或表面制片及含饮片粉末的制剂中饮片的组织、细胞或内含物等进行鉴别的一种方法[1]。从显微鉴别的各个环节进行概述分析,可加强对检验影响因素的控制,使检验效率和准确性得到提高。
1 检验技术及影响因素
1.1 切片技术的应用
切片技术根据原理可分为切片法和非切片法。切片法又分为徒手切片法、滑走切片法、石蜡切片法、冰冻切片法、半薄切片法、超薄切片法。非切片法分为粉末制片法、整体固封制片法、表面制片法、解离制片法和扫描电镜法[2]。切片法多用于观察药材组织细胞的细微结构,而非切片法可保持组织原有的状态及其完整性[2]。不同的切片方法有不同的适用性和局限性,掌握好切片方法,针对不同鉴别对象,选择合适的切片方法,才能达到观察目标物最好的效果。
1.2 常用试液的选用
制片常用的封藏液试液主要有:水合氯醛、水或稀甘油、甘油醋酸试液、甘油乙醇试液、甘油乙醇试液等。常用的显色试剂主要有:间苯三酚试液、苏丹Ⅲ试液、碘试液等[1]。不同的封藏液适用于保存和观察不同的组织结构、细节,或者能起到透化、软化组织的作用。显色试剂通常能更好地对植物细胞后含物如糖类、脂肪、蛋白质、橙皮苷、草酸钙结晶、碳酸钙结晶等进行鉴别,为中药鉴定提供有力依据。因此,熟悉各种封藏液和显色试剂的使用范围和使用效果能使显微鉴别工作事半功倍。
1.3 显微玻片的制片
在显微制片过程中,药材组织切片的取样部位、厚薄程度或药材粉末的细度、数量直接影响制片后的观察效果。在观察药材横切面时,选择的切面能否清晰观察到各个细节,取决于对药材切面生长方向的判断,结构组织的完整性取决于药材外观是否容易剥脱。植物药材的组织寻找,取决于检验员对植物结构的了解,不同特征来自于不同部位[1]。粉末的制片,如果粉末颗粒过粗或者取用粉末数量过多,易导致制片过厚,特征重叠,不利于显微结果的观察。对于部分容易溶解于封藏液,但是法规对封藏液有固定要求的组织,制片速度和观察速度要控制好,以免影响观察效果。
1.4显微镜的使用
在显微鉴别实验中,对显微镜的熟悉和妥善使用是保证鉴别质量的一大重要因素。在使用显微镜的过程中,应防止载玻片和物镜的相互损伤和污染。熟练使用高低倍镜寻找目标,并在合适的物镜下,正确调焦,拍摄目标物,使目标物纹理清晰。
1.5 中药材产地和质量影响因素
地区习用品充当正品、霉变药材、中药饮片不规范炮制、中药材采收期不当、中药材产地加工不规范、混入杂质等情况,或减少增加原本应有或不存在的特征,或显微特征出现明显变化,这些情况显微判定结果多为不符合规定,认定为劣药、假药、掺入杂质等情况[3]。检验人员需对检验的品种有充分了解和理解,在鉴别的时候找准特征要点,避免假药、劣药的混入。
1.6 中药显微特征变化影响因素
近年来,中药材的栽培规模不断扩大,栽培产地不断变迁。影响中药材质量的中药材的基原、种植环境、栽培年限、产地加工等因素也随之不断变化,同时栽培药材的性状变异,导致了以内部组织构造为鉴别依据的显微特征等方面也发现变化[3]。熟悉各种因素下变化状态的中药饮片显微特征,需要检验人员大量的经验累积和专业知识的掌握。
2 结束语
结合上文可知,无论是切片技术、选用的试液、制片技术、显微镜的使用、中药材本身的产地和成长情况都会对检验结果产生影响。在采用显微技术完成检验工作的过程中,应当合理选择切片方法和试液,并做好制片和显微镜使用工作。结合检验情况,对有难度的中药材,选择具有丰富工作经验的检验员,对其进行检验分析,确保检验的准确性。
鉴于中药材显微检验工作的主观性、复杂性,检验结果的质量有赖于检验员对中药材显微知识的积累和运用。查看比对已制定的显微标准、参考国内外专业文献、积极掌握流通药材的常见混品情况,积累不同产地、不同年份中药材显微特征变化,有助于日常显微工作的开展。
参考文献:
[1] 廖 娴,黄月纯. 中药显微鉴别的实习带教探讨[J].卫生职业教育,
2016,34(24):69-70.
[2] 安丽敏,安丽华. 中药显微鉴定常用制片方法概述[J].哈尔滨医药,2016,36(1):78-79.
[3] 鲁轮,陈万发,张南平,陈随清.中药饮片“显微鉴别”项不符合规定的假劣药认定情况解析[J/OL].中成药