目的制备乙型肝炎病毒(HBV)YMDD突变室间质量评价(EQA)调查品，评估上海地区临床实验室检测HBV YMDD突变的能力。方法筛选HBV DNA>5×104 IU/ML的临床样本，经稀释制成含HBV YMDD不同突变类型的样本盘。采用实时荧光聚合酶链反应(PCR)、高温连接酶反应(LDR)和测序法筛选EQA候选样本，并采用PCR评估样本均匀性和稳定性。2017年2次EQA各制备5份样本，要求参评实验室在规定时间内检测样本并上报检测结果。对回报结果进行分析。结果 2017年2次EQA分别收到12份和10份有效回报结果，66.67%的实验室检测结果完全正确。HBV YIDD、YVDD、YIDD+YVDD和YMDD不同突变样本的检测符合率分别为90.63%、86.36%、77.27%和88.24%。结论制备的调查品均匀、稳定，可用于EQA；部分临床实验室HBV YMDD突变检测能力尚需提高，应加强质量控制以保证检测结果的准确性。