球磨-CTAB法提取嗜酸乳杆菌基因组DNA条件优化
臧凯丽1 王泳1 赵林森2 闫亚丽1 崔文静2 马新颖2 赵培1 陈庆森1
1.天津商业大学生物技术与食品科学学院天津市食品生物技术重点实验室2.河北一然生物科技有限公司
摘要: 以嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)为试验菌株,寻找一种高质量、高稳定性的细菌基因组DNA的提取方法。[方法]采用球磨-十六烷基三甲基溴化铵(Cetyltrimethyl ammonium bromide,CTAB)法提取细菌基因组DNA,通过调整研磨珠直径、菌体量、破碎时间三因素对DNA提取效果进行正交优化。[结果]确定最佳优化条件为破碎时间3.5 min、菌体量9×10~8CFU/m L、研磨珠直径0.1 mm。[结论]经条件优化后的球磨-CTAB法短时间内可获得高质量的细菌DNA产品,处理量大、方便快捷。
关键词:
球磨-CTAB法;提取;嗜酸乳杆菌;基因组DNA;正交优化;
球磨-CTAB法;提取;嗜酸乳杆菌;基因组DNA;正交优化