生物技术研究
生物技术研究
生物技术研究
《生物技术研究》系开放获取期刊，主要刊登生物技术工程、微生物、医药、农林、食用菌、轻工食品、环保、食用菌及相关生物学领域的研究论文。本刊支持思想创新、学术创新，倡导科学，繁荣学术，集学术性、思想性为一体，旨在给世界范围内的科学家、学者、科研人员提供一个传播、分享和讨论生物学领域内不同方向问题与发展的交流平台。

ISSN: 3078-932X

《生物技术研究》在线投稿系统

*文章题目:
*作者姓名:
*电子邮箱:
*通讯地址:
*联系方式:

  备      注:

*上传稿件:

支持上传.doc,.docx,.pdf,.txt,.wps文件

投稿须知：

1、审稿结果将于1~7个工作日以邮件告知，请注意查收（包含录用通知书、审稿意见、知网CNKI查重报告）。

2、提交投稿后，若7个工作日之内未接到录用通知，则说明该文章未被录用，请另投他刊。

3、凡投寄本刊稿件，如在内容上有侵权行为或不妥之处，均应文责自负。本刊有权对来稿进行文字编辑、加工和修改，如不同意，请附说明，以便妥善处理。

4、多作者文稿署名时须征得其他作者同意，排好先后次序，通知用稿后不再改动。

5、凡投往本刊稿件一经录用发表，其版权归本刊所有。

6、本刊已全文录入中国知网、万方、维普等数据库，如作者不同意被收录，请提前申明，未申明者，本刊一律视为同意被收录。

7、请勿一稿多投。



提示文字！

注：我们将于1~7个工作日告知您审稿结果，请耐心等待；

您也可以在官网首页点击“查看投稿进度”输入文章题目，查询稿件实时进程。

2025年 2024年 2023年 2022年 2021年 2020年 2019年 2018年

  • 大数据时代运动训练科学研究的新路径 下载：82 浏览：499
  • 淳再清 《生物技术研究》 2018年2期
  • 摘要:
    随着时代的进步与发展,现代化信息服务正逐渐走入人们的生活中,各行各业将大数据时代带来的先进技术运用到工作和生活中,为行业发展带来了全新的理念。在运动训练科学中运用大数据理论,是体育运动的发展趋势,也是一种全新的思维方式。本文从分析大数据时代运动训练科学研究的现状出发,结合传统数据时代运动科学研究出现的问题,对运动训练科学研究的新路径提出几点建议。
  • 响应面优化超声波辅助提取蓝靛果花色苷及抗炎活性研究 下载：71 浏览：500
  • 张聪1 张彦龙1 白龙林1 赵丹丹1,2 《生物技术研究》 2020年12期
  • 摘要:
    为筛选超声波辅助法提取蓝靛果花色苷的最佳提取条件并对花色苷的抗炎活性进行初步探讨。[方法]以勃利县野生蓝靛果为原料,在单因素试验基础上,利用Box-Behnken软件进行响应面优化分析。采用CCK-8法检测花色苷对巨噬细胞RAW264. 7增殖的影响,采用Griess法检测花色苷对RAW264. 7细胞NO释放能力的影响。[结果]蓝靛果花色苷超声辅助的最佳提取条件为乙醇浓度80%、料液比1∶10、超声功率80 W、超声时间40 min,且花色苷具有抗炎活性。[结论]利用响应面法可获得超声波辅助提取蓝靛果花色苷的最佳工艺参数,在此工艺条件下,花色苷提取量为596. 235 mg/100 g,花色苷提取液(25～400μg/m L)对巨噬细胞RAW264. 7增殖无影响,能够显著抑制NO释放。
  • 刺五加果中齐墩果酸、熊果酸的提取工艺优化 下载：82 浏览：493
  • 佟潇禹1,2 薛蓓3 刘振东3 张彦龙1,2 《生物技术研究》 2020年12期
  • 摘要:
    为了优化刺五加果实中齐墩果酸、熊果酸的提取工艺,探究其最优提取条件。[方法]通过单因素试验的方法考察乙醇浓度、提取温度、提取时间三个因素对两种三萜提取率的影响,根据结果选择对得率影响较大的3个水平,以三因素三水平设计响应面优化试验,分析得到最优条件并验证。[结果]刺五加果实中齐墩果酸、熊果酸的最优提取条件为:乙醇体积分数81%,提取时间50 min,提取温度50℃,在此条件下两种三萜的总得率为31. 021 7 mg/g。各因素对提取率的影响程度为乙醇浓度>提取温度>提取时间。[结论]在优化得到的条件下提取,齐墩果酸、熊果酸的总得率为31. 021 7 mg/g,与预测值31. 025 3 mg/g基本相符,说明条件优化合理,可用于对刺五加果中齐墩果酸、熊果酸的提取条件优化。
  • 澳洲茄碱抑制人膀胱癌5637细胞增殖及其机制研究 下载：71 浏览：505
  • 郭风1 石理冉1 张晓颖2 赵伟1 《生物技术研究》 2020年12期
  • 摘要:
    探究澳洲茄碱对人膀胱癌细胞株5637细胞增殖的影响,并初步揭示其相关机制,为膀胱癌治疗提供新的方向。[方法]以人膀胱癌5637细胞为研究对象,将浓度为5、10、20、40、80μmol/L的澳洲茄碱分别作用于细胞24h、48 h、72 h,MTT法计算各组细胞增殖率,据此设置空白对照组、溶剂对照组、以及不同浓度梯度(10、20、40、80μmol/L)的澳洲茄碱处理组作为后续实验分组。24 h后使用显微镜观察细胞形态变化,Western Blotting检测相关凋亡蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3的表达变化情况。[结果] 10μmol/L的澳洲茄碱在24 h时即可显著地抑制5637细胞的增殖,且抑制作用具有时间和浓度依赖性;澳洲茄碱处理后的5637细胞具有细胞凋亡形态学变化; Western Blotting结果表明,在一定浓度范围内,与空白对照组相比,促凋亡蛋白Bax、Caspase-3表达量随澳洲茄碱浓度增大而升高,而抑凋亡蛋白Bcl-2表达量下降,差异均具有统计学意义(P <0. 05)。[结论]澳洲茄碱可抑制人膀胱癌5637细胞增殖,其机制之一是通过调控凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2及Caspase-3的表达而诱导细胞凋亡。
  • 转移性肾癌患者的预后影响因素分析 下载：81 浏览：506
  • 刘峰蔡 孟会 葛天宇 冯子豪 黄坤平 葛波 《生物技术研究》 2020年12期
  • 摘要:
    旨在基于SEER数据库,筛选转移性肾癌患者的独立预后危险因素,建立一个可靠的预测模型来预测转移性肾癌患者的总体生存率(Overall survival,OS),从而帮助临床诊断和治疗。[方法]从SEER数据库中确定了2 912例转移性肾癌患者。随机选择纳入患者中70%(n=2 040)作为建模组,其余30%患者(n=872)作为验证组。由建模组构建预测模型,并使用验证组进行验证。经过单因素与多因素Cox回归,筛选出独立预后危险因素,并全部纳入用于构建列线图预测模型,并通过计算C指数(C-index)、绘制校准曲线及受试者工作曲线下面积(AUC),检验模型的准确性。[结果]根据多因素分析结果,诊断年时龄、肿瘤分期、病理分级、组织学类型、手术、肝转移、脑转移和肾转移与转移性肾癌患者的总体生存率(OS)相关。转移性肾癌患者的8个独立危险因素被纳入列线图预测模型。预测模型C指数0. 709显著高于第7版AJCC分期系统C指数0. 614。校准曲线显示,模型预测生存率与实际生存率之间的一致性,进一步验证了模型的区分能力及校准能力。[结论]该模型预测患者的总体生存率的C指数(C-index=0. 751)大于第7版AJCC分期系统的C指数(C-index=0. 697),该列线图预测模型能够较准确预测转移性肾癌患者预后状态,并较传统TNM分期系统有所改善,能够更好地指导临床决策。
  • 钙离子调控蛋白在肿瘤血管形成及肿瘤发展中的研究进展 下载：73 浏览：484
  • 李会 王运丹 王君 张慧敏 李佳蓬 王腊 项园 廖兴华 包乐媛 《生物技术研究》 2020年11期
  • 摘要:
    探讨钙离子调控蛋白在肿瘤血管生成及肿瘤发展中的作用。[内容]Ca2+作为第二信使参与生命活动中多种途径的调控,钙离子调控蛋白作为Ca2+的生物信息传递载体在此过程中起着重要作用。肿瘤组织中血管内皮细胞及平滑肌细胞的激活是肿瘤新生的第一步,新生血管的形成能促进实体瘤生长、侵袭和转移。该文综述了参与钙离子浓度调控的钙调控蛋白S100蛋白、膜联蛋白(Annexin)、钙网蛋白(CRT)、钙调蛋白Ca M及其他非直接钙离子结合的钙调控蛋白,这些蛋白在肿瘤细胞中的表达水平,及如何通过调控血管内皮细胞及平滑肌细胞的功能进而影响肿瘤血管生成与肿瘤转移,该综述聚焦重点是肺癌的研究,也对其他常见癌症有涉及。[结论]钙离子调控蛋白是一种重要的调节血管形成和肿瘤发展的一类蛋白,是肿瘤发展的标志物及肿瘤治疗的潜在靶点。
  • 人NR2F2基因的克隆及其生物信息学分析 下载：73 浏览：487
  • 海那尔·乌拉孜巴依1,2 叶尔那扎尔·努尔吐热1 陈小玲2 张富春1 张茂祥2 《生物技术研究》 2020年11期
  • 摘要:
    克隆人NR2F2(Nuclear Receptor subfamily 2,group F,member 2)基因并分析其生物学特性。[方法]根据NCBI数据库提供的人NR2F2基因序列设计其特异性引物,通过PCR扩增目的基因,并将其连接到p ET-28a载体上,然后进行酶切鉴定与DNA测序来确定人NR2F2基因克隆的正确性,再利用生物信息学在线工具分析人NR2F2蛋白的生物学特性。[结果]酶切鉴定与DNA测序结果表明人NR2F2基因开放阅读框为786 bp,编码261个氨基酸残基,分子量为29 162.79 Da,p I为5.96。NR2F2蛋白是主要位于细胞质和细胞核中的亲水性蛋白,不含跨膜结构域,无信号肽,其二级结构由α螺旋、无规则卷曲和延伸链构成,并且三级结构与二级结构预测结果一致。[结论]克隆获得人NR2F2基因,其编码的蛋白质属于类固醇/甲状腺激素受体超家族,α螺旋和无规则卷曲为二级结构中最主要的结构元件。GO注释分析表明,人NR2F2属于转录因子,参与序列特异性DNA结合、基因转录、RNA的生物合成、RNA代谢等过程。
  • 萤火虫Luc基因的克隆及生物信息学分析 下载：81 浏览：494
  • 许勇 张忠东 李静 王红萍 王娟 胡倩 赵娜娜 《生物技术研究》 2020年11期
  • 摘要:
    克隆野生型虫荧光素酶(luciferase)基因(Luc)全长序列并对其进行生物信息学分析。[方法]以虫荧光素酶报告栽体p XP2 DNA为模板,应用PCR技术,获得萤火虫Luc基因目标条带并克隆到p GEM-T-Easy载体,利用CD search、Prot Param、Prot Scale和SOMPA等11种预测软件对其保守区域、一级结构、理化性质、空间结构及活性区域等进行预测分析。[结果]该酶由551个氨基酸残基组成,属于可溶性亲水蛋白。其二级结构主要由无规卷曲和α-螺旋组成。三级结构以6q2m.1的A链为模板进行同源建模,其活性区域由125个氨基酸残基构成,面积和体积分别为2 483.879?2和1 834.454?3。在该蛋白质的活性区域之外,筛选出38个具备引入二硫键条件的潜在位点。[结论]成功克隆了Luc基因,并对野生型虫荧光素酶进行了生物信息学分析预测,为进一步过定点突变提高虫荧光素酶的热稳定性奠定了理论基础。
  • 胰高血糖素样肽-1融合蛋白在原核系统中的表达 下载：73 浏览：488
  • 桑延霞 张军军 《生物技术研究》 2020年11期
  • 摘要:
    构建点突变的GLP-1Gly8,并与人血清白蛋白(HSA)结构域Ⅰ融合,延长GLP-1的半衰期。[方法]采用常规PCR扩增白蛋白结构域Ⅰ片段,利用SOE-PCR扩GLP-1Gly8基因并将两个基因拼接,得到的HSA-GLP-1Gly8融合基因经Bam HⅠ和XhoⅠ双酶切后连接到p ET30a表达载体,重组质粒p ET30a-HSA-GLP-1Gly8转入E.coli BL21(DE3)宿主菌中进行IPTG诱导表达。[结果]PCR扩增分别获得140 bp的GLP-1Gly8基因499 bp的HSA的片段及经融合后的HSA-GLP-1Gly8基因。表达载体p ET30a-HSA-GLP-1Gly8在E.coli BL21(DE3)宿主菌中经IPTG诱导,过表达了分子量约为22 k Da的融合蛋白。[结论]成功构建了p ET30a-HSA-GLP-1Gly8原核表达载体,融合蛋白在BL21(DE3)菌中以包涵体的形式过表达。
  • 解淀粉芽孢杆菌TF28活菌定量PMA-qPCR技术 下载：67 浏览：482
  • 张淑梅1,2 姜威1,2 胡基华1 孟利强1,2 李晶1,2 夏海华1,2 《生物技术研究》 2020年11期
  • 摘要:
    建立解淀粉芽孢杆菌TF28特异性活菌分子定量技术。[方法]基于TF28特有基因设计q PCR引物,建立菌株特异性q PCR技术;优化PMA处理条件,建立PMA-q PCR定量TF28活菌技术,对其特异性、灵敏性与可靠性进行检测。[结果]建立的q PCR技术对菌株TF28具有特异性。优化的PMA处理条件为:PMA终浓度150μmol/L、暗培养10 min、光照20 min,在此条件下,可封闭106cfu/m L以下死菌基因组DNA;建立的PMA-q PCR技术特异性强,灵敏度高,最低检测限102cfu/m L;线性关系好,R2=0.997;在菌浓度103cfu/m L～107cfu/m L范围内重复性好,CT值变异系数小于2%,与平板活菌计数比较,差异不显著。[结论]建立的PMA-q PCR技术对TF28具有特异性,能够对菌浓度103cfu/m L～107cfu/m L活菌进行定量。
  • Annexin V-FITC/DAPI细胞凋亡检测法 下载：81 浏览：513
  • 刘钰妮1 王世恩1 汪湘1 任雪1 夏燕2 孙鹏3 曹春雨1 《生物技术研究》 2020年10期
  • 摘要:
    建立新的荧光染料DAPI与FITC标记Annexin V联合的细胞凋亡流式细胞术检测方法,以用于具有橙红色荧光的药物处理细胞的流式细胞术凋亡检测。[方法]以倒置荧光显微镜成像和流式细胞仪分别检测不同浓度DAPI对活和死细胞的标记作用。以荧光酶标仪检测不同浓度DAPI处理细胞的荧光信号,并进行相关性分析。以流式细胞术比较Annexin V-FITC/DAPI双染法与Annexin V-FITC/PI双染法对无色和含红/橙色荧光药物导致的细胞凋亡。[结果]DAPI标记可用于区分死细胞和活细胞,DAPI标记死细胞的荧光信号和DAPI的浓度呈线性正相关。Annexin V-FITC/DAPI双染法与Annexin V-FITC/PI双染法相比,二者对不含红橙色荧光药物诱导的多种肿瘤细胞的凋亡检测结果无显著差异。与Annexin V-FITC/PI双染法相比,Annexin V-FITC/DAPI双染法可有效避免药物自身荧光与PI通道重合导致的流式检测干扰。[结论]成功建立了新的Annexin V-FITC/DAPI双染法用于细胞凋亡的流式细胞术检测,该方法能够避免具有红、橙色荧光基团的药物对的干扰检测凋亡。
  • 心血管疾病相关的沙门氏菌的检测新方法建立 下载：73 浏览：501
  • 鞠传静1 卜胜君2 万家余1,2 《生物技术研究》 2020年10期
  • 摘要:
    建立对沙门氏菌的新型快速可视化检测方法。[方法]显色纳米花作为沙门氏菌的感受器及换能器,免疫磁珠作为富集和分离手段,最终与靶标沙门氏菌形成三明治夹心结构,检测信号以纳米花显色方式输出。[结果]检测沙门氏菌的线性范围在10～104CFU/m L,检测限10 CFU/m L,实际样品回收率可达117.5%,且特异性良好。[结论]成功建立了基于新型显色纳米花的沙门氏菌定性定量的检测方法,灵敏性可达10 CFU/m L,与传统临床检测方法相比,具有快速、简便、灵敏、无需大型仪器的优点。
  • Rab19在胃癌中的表达及其与预后的相关性 下载：81 浏览：519
  • 宋玲 张洪 冯豆 高洁芳 范月莹 《生物技术研究》 2020年10期
  • 摘要:
    Rab19属于Ras-GTPase基因家族成员,探讨Rab19表达在胃癌诊断和预后中的价值。[方法]从肿瘤基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中下载胃癌数据集表达谱及临床病理特征资料。评估Rab19 mRNA在GC中的表达水平。通过Kaplan-Meier和Cox分析,确定Rab19在胃癌中的预后价值。使用TCGA数据集进行基因集富集分析(GSEA)以预测胃癌中Rab19作用的分子机制。[结果]Rab19在胃癌中过表达(P <0.0001),且Rab19的表达与肿瘤分级和瘤体大小都有显著相关(P <0.05)。生存分析结果显示Rab19高表达与胃癌患者生存时间长相关(P <0.05)。Rab19表达可作为胃癌患者的独立预后因子(P <0.005)。此外,过氧化物酶体、状腺癌、泛酸和Co A生物合成、鞘脂代谢、细胞凋亡、硒氨基酸代谢、Notch信号传导途径和子宫内膜癌相关的基因集与Rab19的高表达表型存在差异。[结论]Rab19在胃癌细胞中明显上调,有望成为胃癌的诊断和预后中的有效生物标志物。
  • WDR1在PC9细胞对AZD9291抗性形成中的影响 下载：94 浏览：501
  • 胡继盛 李紫怡 杨子豪 刘钟颖 黄霞 《生物技术研究》 2020年10期
  • 摘要:
    探究WDR1在PC9细胞形成对AZD9291耐药中的作用。[方法]构建PC9耐奥西替尼(AZD9291)细胞株(PC9/AR),通过qRT-PCR和Western Blot检测PC9/AR细胞中WDR1的水平;通过siRNA敲降Wdr1后,用CCK8实验检测细胞存活率;在敲降Wdr1的基础上过表达cofilin,通过CCK8检测细胞的存活率;在PC9细胞中过表达Wdr1,在AZD9291的处理下检测细胞存活率。[结果]WDR1和Cofilin在PC9/AR细胞中与正常细胞相比蛋白水平上分别有2.5倍和1.5倍的上升;敲降Wdr1,细胞活性显著下降(P <0.05)。敲降Wdr1后,过表达cofilin,细胞的存活率显著提高(P <0.05)。[结论]WDR1能显著性增强PC9细胞对AZD9291的抗性,并且通过ADF/cofilin介导的肌动蛋白动力学来促进这一过程的。
  • 水解南珠液抑制细胞自噬减轻人微血管内皮细胞氧化损伤 下载：67 浏览：500
  • 刘鹏1 林江1 贾微1 兰太进1 岑妍慧1,2 《生物技术研究》 2020年10期
  • 摘要:
    以人微血管内皮细胞(human microvascular endothelial cell-1,HMEC-1)为研究对象,采用H2O2诱导内皮细胞氧化应激,探讨南珠水解液对HMEC-1细胞氧化损伤的保护作用及机制。[方法]采用生化检验法检测南珠水解液作用后,HMEC-1细胞内超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione Peroxidase,GSH-PX)活性及丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量变化;采用流式细胞仪检测细胞内活性氧(Reactive Oxygen,ROS)含量变化;采用透射电镜观察自噬体;采用免疫荧光实验检测细胞微管相关蛋白轻链3Ⅰ/Ⅱ(Microtubuleassociated protein light chainⅠ/Ⅱ,LC3Ⅰ/Ⅱ)表达变化。[结果]与氧化损伤组相比,不同浓度南珠水解处理组SOD活性显著增加,分别提高8.68%、24.99%和49.43%; GSH-PX活性无显著变化; MDA显著降低,分别降低36.99%、35.82%和60.25%;且给药组细胞内ROS含量相比氧化损伤模型组显著降低,分别降低5.18%、15.55%和32%;透射电镜结果显示对照组细胞内无明显自噬小体,氧化损伤组可见明显的双层膜结构的自噬小体,用不同浓度南珠水解液处理后,随着浓度的增加自噬小体含量显著减少;免疫荧光实验结果显示,与氧化损伤组相比,南珠水解液组LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ蛋白比值显著降低,分别降低19.21%、29.76%和33.71%。[结论]南珠水解液对氧化损伤的HMEC-1细胞有一定的修复作用,这种作用可能是通过抑制细胞自噬,并促进SOD活性水平提升,降低MDA和ROS含量,从而减轻H2O2诱导的HMEC-1细胞氧化损伤。
  • 蝉拟青霉液体培养条件优化 下载：59 浏览：488
  • 艾仁丽1 谭艾娟1 吕世明2 《生物技术研究》 2020年9期
  • 摘要:
    建立能够有效提高蝉拟青霉液体培养效率的培养体系,增加其生物量。[方法]以蝉拟青霉生物量作为响应值,通过Plackett-Burman实验设计从8个试验影响因素中筛选出3个主要影响因素,基于3因素3水平的BoxBehnken设计法以及响应面分析法研究影响蝉拟青霉液体培养各因素之间的交互作用。[结果]通过Plackett-Burman设计法确定影响最为显著的因素为接种量、p H和温度,利用最陡爬坡试验确定最佳范围在接种量7%、p H 6.00、温度25℃附近,借助Box-Behnken设计法最终确定最佳液体培养条件为:葡萄糖20 g/L、蛋白胨3 g/L、酵母膏2 g/L、KH2PO41 g/L、MgSO40.5 g/L、接种量6.65%、p H 6.00、温度24.01℃。优化后的培养体系所培养的蝉拟青霉其生物量从优化前的147.106 0 g/L提高到239.475 3 g/L,提高了62.79%。[结论]优化后的培养体系能够有效提高蝉拟青霉生物量,该方法对于优化蝉拟青霉生物量发酵条件是一种有效、可行的方法。
  • 负载白藜芦醇自组装多肽水凝胶的抗菌性能研究 下载：70 浏览：486
  • 赵晨辰 杨睿陶 苏皖 许娜 周俊 《生物技术研究》 2020年9期
  • 摘要:
    制备一种负载白藜芦醇的自组装多肽水凝胶并探讨其抗菌性能。[方法]通过自组装制备多肽(FmocFFGGRGD)水凝胶和载有白藜芦醇的多肽水凝胶(Pep/RES);通过扫描电子显微镜和透射电子显微镜观察水凝胶的形貌和内部结构;通过流变仪检测水凝胶的流变性质;通过高效液相色谱检测Pep/RES的释放速率;通过细胞毒性试验研究该水凝胶的生物相容性;通过抑菌圈实验和活死细菌染色研究Pep/RES对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抗菌性能。[结果]多肽溶液可在30 min内自组装形成稳定的水凝胶,水凝胶内部的三维结构密度随多肽浓度的增加而增加,2.0wt%浓度的多肽水凝胶稳定效果最好。白藜芦醇从Pep/RES水凝胶中缓慢释放7 d释放量达到50%,Pep/RES浸泡液对NIH/3T3细胞表现出良好的生物相容性。Pep/RES水凝胶中负载的白藜芦醇浓度为512μg/m L时,对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径即可达到5.41±0.18 mm,但即使白藜芦醇浓度达到1 024μg/m L,对大肠杆菌的抑菌圈直径仅为4.27±0.22 nm。[结论]Pep/RES结构稳定,安全无毒,能缓释白藜芦醇,并对金黄色葡萄球菌具有显著抑制作用。
  • 莲藕盐诱导基因CBL2的克隆与表达 下载：467 浏览：485
  • 韩玉燕 杨健君 程立宝 《生物技术研究》 2020年9期
  • 摘要:
    CBL家族基因在植物耐盐过程中起到重要的作用。该实验从耐盐莲藕中克隆了CBL2基因的全长cDNA序列,对其表达进行分析。[方法]根据前期测序得到的转录组数据,发掘到莲藕CBL2的ESTs序列,并克隆到全长莲藕CBL2。在此基础上,对CBL2的表达进行分析。[结果]CBL2的cDNA序列长度645 bp,与其他物种CBL2的同源性分析对比结果表明,莲藕CBL2与山葡萄Va CBL2的相似率较高,同源性达90%以上。利用半定量和qRT-PCR对克隆到的莲藕基因CBL2的表达进行分析,结果表明CBL2受NaCl诱导,CBL2在NaCl处理后12 h表达量达到最大值。另外CBL2在ABA处理后表达量增加,处理6 h后达到最大值。[结论]CBL2在NaCl处理12 h与ABA处理6 h诱导表达,暗示CBL2基因在莲藕耐盐特性方面起重要的作用,并参与ABA信号转导途径。
  • 人CDK9基因真核表达及其与TP53蛋白的相互作用 下载：68 浏览：487
  • 熊玉锋 邹培伟 钟田花 黄研 穆小萍 《生物技术研究》 2020年9期
  • 摘要:
    构建细胞周期依赖性蛋白激酶9(CDK9)的真核表达载体pEnter-CDK9-His,利用HEK 293T真核表达系统表达CDK9蛋白并验证其与TP53蛋白之间的相互作用。[方法]利用聚合酶链反应从Hela细胞中扩增出CDK9靶基因序列,并将扩增出的CDK9基因片段通过无缝克隆技术克隆至pEnter载体上,经过PCR和一代测序验证插入位置正确且无突变后转染至人胚肾HEK 293T细胞,利用GST-pulldown技术检测本研究所表达的CDK9蛋白与TP53蛋白之间的相互作用。[结果]重组质粒pEnter-CDK9-His的插入基因序列与目的序列完全一致,蛋白免疫印迹检测到融合蛋白表达; GST-pulldown实验证实了CDK9蛋白与TP53蛋白存在直接的相互作用。[结论]成功构建了人CDK9基因的真核表达载体pEnter-CDK9-His,证实了所表达的CDK9融合蛋白与TP53蛋白存在着直接的相互作用,具有一定的生物学功能,为进一步研究CDK9和TP53在肿瘤发生发展以及治疗过程中发挥的功能奠定了基础。
加入编委加入审稿人
生物技术研究  期刊指标
出版年份 2018-2025
发文量 661
访问量 125087
下载量 30576
总被引次数 275
影响因子 0.893
为你推荐
学术共建