文章-世纪中文出版社

金黄色葡萄球菌前噬菌体PT1028ORF001基因的生物信息学分析及原核表达下载：76 浏览：491

何文迪1 陈新江1 吴立山2 盛佩群1 吴玲净1 陈逸璐1 羊晓敏1 吴佳艳1 李文通1 《生物技术研究》 2019年12期

摘要:

对金黄色葡萄球菌前噬菌体的PT1028ORF001基因进行生物信息学分析,并进行原核表达,为金黄色葡萄球菌前噬菌体基因的功能研究提供参考数据。[方法]将金黄色葡萄球菌ATCC 25923菌株功能未知的基因通过BLAST比对,从中发现了一个噬菌体PT1028的基因序列,将该基因命名为PT1028ORF001。使用Protparam、Prot Comp9. 0、NCBI保守结构域数据库、TMpred、Net Phos 3. 1 Server、PSIPRED、SWISS-MODEL等在线生物信息软件,分析PT1028ORF001蛋白的理化性质、亚细胞定位、保守结构域、跨膜区域、磷酸化修饰位点、二级结构和三维结构。用自行设计的引物扩增PT1028ORF001基因,扩增产物经酶切回收后与原核表达载体p ET-32a相连接,构建重组表达质粒,将该重组质粒转化E. coli TG1内,经菌落PCR鉴定后,增菌培养并提取质粒,再转化E. coli BL21 (DE3),经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE检测分析。[结果]PT1028ORF001蛋白由569个氨基酸组成,相对分子质量为64 671. 34 Da,等电点为8. 07,负电荷氨基酸残基总数为71个,正电荷氨基酸总数为73个,分子式:C2894H4530N762O885S16,原子总数9087个,是一种稳定的亲水蛋白质,定位于细胞膜上,与功能未知的DUF927蛋白超家族具有高度同源性,第202-223、240-258位氨基酸分别形成一个典型的跨膜区,潜在的磷酸化修饰位点共71个,二级结构中ɑ螺旋占比最高(40. 60%),其次是无规则卷曲(39. 89%),三维空间结构与二级结构预测结果相符。成功构建了表达载体p ET-32a(+)-PT1028ORF001,经IPTG诱导后重组蛋白获得了表达,蛋白相对分子质量为82. 4 k Da。[结论]PT1028ORF001基因的生物信息学分析结果以及该基因的成功克隆与表达,为深入研究该蛋白及其他金黄色葡萄球菌前噬菌体基因的功能奠定了一定基础。

金黄色葡萄球菌ymdB基因的克隆表达及生物信息学分析下载：71 浏览：487

夏佳音1 陈新江2 李文通2 吴佳艳2 羊晓敏2 《生物技术研究》 2019年9期

摘要:

克隆、表达金黄色葡萄球菌ymd B基因,并对其编码产物进行生物信息学分析。[方法]以金黄色葡萄球菌ATCC 25923菌株的基因组DNA为模板,用聚合酶链式反应扩增ymd B基因,将扩增基因酶切后与表达载体pET-32a(+)连接,构建重组质粒并转化大肠杆菌TG1,增菌培养后提取质粒,经PCR、基因测序鉴定后,再转化大肠杆菌BL21(DE3),对转化菌株进行诱导后,进行10%SDS-PAGE分析。使用Protparam、PSORT、CDD、Signal P 4. 1、TMpred、Net Phos 3. 1 Server、PSIPRED、SWISS-MODEL等软件,分析YmdB蛋白的氨基酸数目、相对分子质量、理论等电点、带电荷氨基酸总数、半衰期、稳定性、疏水性、亚细胞定位、保守结构域、信号肽、跨膜区、磷酸化位点、二级结构、三维结构等。[结果]构建了表达载体pET-32a(+)-ymd B,在37℃经异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后获得表达。YmdB蛋白由266个氨基酸组成,相对分子质量为30134. 53Da,等电点为6. 23,正电荷氨基酸总数为33个,负电荷氨基酸总数为35个,在大肠杆菌内的半衰期为10 h以上,是稳定的亲水蛋白质,定位于细胞质中,与YmdB蛋白家族具有相似的保守结构域,没有信号肽,有一个跨膜区和14个磷酸化位点,二级结构中ɑ螺旋、β折叠和无规则卷曲分别占42. 11%、9. 40%、48. 49%,三维空间结构与二级结构预测结果大致相同。[结论]成功克隆、表达了金黄色葡萄球菌ymdB基因,并对YmdB蛋白进行了生物信息学分析,为深入研究该蛋白的分子作用机理打下一定基础。

藻粉对宽体金线蛭生长、酶活性和基因表达的影响下载：18 浏览：266

闫晶男1 吴怡蓉1 张雨婷1 江玲丽2 高有领1 《中国水产学报》 2024年6期

摘要:

为揭示方形环棱螺搭配投喂蛋白核小球藻粉或螺旋藻粉对宽体金线蛭生长、消化酶活性、抗凝血酶活性和相关基因表达的影响，将体质量(4.15±0.03)g的宽体金线蛭随机放入38.5cm×27.5cm×13.5cm的透明塑料盒中，每盒20条，分别投喂方形环棱螺(螺组)、方形环棱螺加蛋白核小球藻粉(小球藻粉组)和方形环棱螺加螺旋藻粉(螺旋藻粉组)30d,螺每1d、藻粉每2d投喂1次，养殖30d时，测定生长激素(GH)、胰岛素样生长因子(IGF1)等生长相关基因的表达量，α-葡萄糖苷酶(α-GLU)、甘油三酯酶(ATGL)和蛋白酶(PT)消化酶相关基因的表达量，及免疫相关基因超氧化物歧化酶(SOD)和水蛭素(WP)基因的表达量。结果表明：10、20d和30d小球藻粉组宽体金线蛭的体质量高于其他组(P<0.05), 10d的特定生长率高于螺组(P<0.05),25d和30d的高于螺旋藻粉组(P<0.05),30d的摄食量高于其他两组(P<0.05),饲料系数在10d优于螺组，且在30d优于螺旋藻粉组(P<0.05);养殖30d后，各组存活率在91.67%以上；小球藻粉组和螺旋藻粉组抗凝血酶活性在30d均高于螺组(P<0.05),小球藻粉组的脂肪酶活性高于螺组和螺旋藻粉组(P<0.05);小球藻粉组宽体金线蛭的GH、IGF1和PT基因表达量在30d高于螺旋藻粉组且小球藻粉组的GH和PT基因表达量高于螺组(P<0.05)。综上所述，蛋白核小球藻粉作为辅助饵料与方形环棱螺搭配投喂宽体金线蛭30d,显著促进了生长，提高了脂肪酶和抗凝血酶的活性，影响了相关基因的表达。

探究课程思政在大学生职业生涯规划教学中的有效融合下载：105 浏览：2046

邓玉刚《中国职业教育》 2022年8期

摘要:

大学生职业生涯规划是大学教育中的重要课程，对大学生的未来发展有着积极作用。而“课程思政”能引导大学生树立正确的思想价值，从而促进大学生更好的发展。因此，教师应重视“课程思政”与大学生职业生涯规划融合教学的作用，引导大学生树立起社会责任意识，让大学生积极承担起社会的重任，助力大学生未来更好的发展。本文主要论述“课程思政”与大学生职业生涯规划融合教学方面的内容，旨在发挥出“课程思政”的优势，引导大学生主动承担起发展社会的重任，这对大学生的个人发展有着积极意义。

“一带一路”背景下中医药文化海外传播现状分析下载：171 浏览：2038

张园园李谋多（通信作者）陶涛陈芸《当代中医药》 2023年12期

摘要:

中医药文化源远流长，历史上一直对周边国家乃至世界产生强大的吸引力和影响力。随着我国在世界舞台影响力的增强，中医药走向世界的步伐也在加快，中医药文化已经成为世界认识中华传统文化的重要载体。尤其在“一带一路”倡议背景下，中医药文化海外传播取得了众多成就，同时也面临一些障碍。本文通过对中医药文化海外传播现状进行总结分析，以期为不断提升中医药在国际上的影响力提供一定的参考和借鉴。

知母乌梅复合颗粒对小鼠血糖水平的影响下载：259 浏览：2283

朱霞贾琼《医学研究前沿》 2021年2期

摘要:

本文探讨知母乌梅复合颗粒对正常小鼠及四氧嘧啶所致高血糖小鼠的降血糖作用。方法：采用四氧嘧啶致高血糖小鼠模型，连续灌胃给予知母乌梅复合颗粒30d，检测实验前后小鼠血糖变化，然后灌胃给予葡萄糖溶液，测定葡萄糖负荷后不同时间点小鼠的血糖值；同法考察知母乌梅复合颗粒对高血糖模型小鼠体重、血糖值和糖耐量的影响。结果：知母乌梅复合颗粒对正常小鼠体重、空腹血糖，以及模型小鼠体重均无显著影响；知母乌梅复合颗粒各剂量组对模型小鼠空腹血糖值有明显降低作用(P＜0.01);低剂量组0h、0.5h的血糖值及血糖曲线下面积于0g/kg·bw/d组，且差异有统计学意义（P>0.05）；中、高剂量组0h、0.5h、2h的血糖值及血糖曲线下面积低于0g/kg·bw/d组，且差异有统计学意义（P<0.05）。结论：知母乌梅复合颗粒可降低四氧嘧啶所致高血糖小鼠的空腹血糖，且对其糖耐量有调节作用。

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