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化学发光法检测半乳糖凝集素3的性能评价及其在心力衰竭中的初步应用 下载：81 浏览：495

郑笑荣1 万军2 张良颖3 李永姝4 韩雪晶4 石萍4 贾克刚4 《国际检验医学》 2019年10期

摘要:
目的评价化学发光法检测半乳糖凝集素3(Gal-3)的分析性能并初步探讨其对心力衰竭(HF)的诊断价值。方法依据相关文件评价化学发光法检测Gal-3的分析性能[空白检测限(LoB)、检出限(LoD)、定量限(LoQ)、精密度、线性范围及抗干扰能力]并验证厂家声明的参考区间，比较年龄、性别和样本类型对化学发光法测定Gal-3的影响。检测55例HF患者(HF组)及80名体检健康者(正常对照组)的血浆Gal-3水平，采用受试者工作特征(ROC)曲线评估Gal-3诊断HF的价值。结果 Gal-3试剂(化学发光法)生产厂家声明的LoB、LoD、LoQ分别为0.80、1.0、1.0 ng/mL，验证均通过。重复精密度[以变异系数(CV)表示]为1.9%～4.8%、期间精密度(以CV表示)为2.6%～6.1%，精密度验证通过。在4.07～113.11 ng/mL范围内，化学发光法测定Gal-3呈线性。血红蛋白<20 g/L、总胆红素(TB)<403.2μmol/L、直接胆红素(DBil)<214.08μmol/L、乳糜浊度<7 450 FTU对化学发光法检测血清Gal-3无干扰。血浆的Gal-3测定值高于血清(P<0.05)。男、女性之间Gal-3水平差异无统计学意义(P>0.05)。将研究对象按样本类型(血清、血浆)分组后再按年龄分组，血清组中3个年龄亚组(20～<45岁组、45～<60岁组、≥60岁组)之间Gal-3水平差异有统计学意义(P<0.05)，血浆组2个年龄亚组(20～<60岁组、≥60岁组)之间Gal-3水平差异有统计学意义(P<0.05)。Gal-3水平随年龄增高而升高。HF患者血浆Gal-3水平明显高于正常对照者(P<0.001)。ROC曲线分析显示，血浆Gal-3诊断HF的曲线下面积(AUC)为0.969，最佳临界值为20.04 ng/mL，敏感性为85.5%，特异性为100.0%。结论化学发光法检测Gal-3的分析性能良好，需注意的是年龄对Gal-3水平有一定的影响。Gal-3对HF有较高的辅助诊断价值。

基于蛋白质组学的菲律宾蛤仔凝集素MCL-T抑制腐败希瓦氏菌机理研究 下载：32 浏览：360

杨晴晴1 金祎雯1 李伟1 赵菲1 孔亮2佟长青1 《中国水产学报》 2021年5期

摘要:
为探究菲律宾蛤仔Ruditapes philippinarum凝集素(MCL-T)诱导产生及其抑制腐败希瓦氏菌Shewanella putrefaciens的作用机制,以腐败希瓦氏菌刺激菲律宾蛤仔,并利用固相吸附分析MCL-T与腐败希瓦氏菌外膜蛋白(outer membrane proteins, OMP)的相互作用,利用非标记(Label-free)定量蛋白质组方法对MCL-T作用于腐败希瓦氏菌的蛋白质组进行分析。结果表明:注射比浸泡方式产生更多的MCL-T;MCL-T与腐败希瓦氏菌外膜蛋白结合具有浓度依赖性;MCL-T作用于腐败希瓦氏菌后,有74个蛋白质表达量变化显著,其中,16个蛋白质表达量上调,58个蛋白质表达量下调,这些差异表达蛋白质主要参与氨基酸生物合成途径、丙酮酸代谢途径、柠檬酸循环途径、氨酰-tRNA生物合成途径和碳代谢途径。研究表明,MCL-T是通过影响腐败希瓦氏菌体内氨基酸合成、丙酮酸代谢和柠檬酸循环等实现其抑菌作用。

三疣梭子蟹C-型凝集素CTL5基因的克隆及在病原刺激下的免疫应答 下载：51 浏览：388

阎德平1,2 吕建建3,2 题兴斌2 张文1,2 张云滨2 宋柳2 刘萍3,2 《中国水产学报》 2020年3期

摘要:
为明确三疣梭子蟹Portunus trituberculatus C-型凝集素CTL5的结构和功能,采用cDNA末端快速扩增(Rapid amplification of cDNA end,RACE)技术克隆获得三疣梭子蟹C-型凝集素CTL5基因(PtCTL5)的cDNA全长。结果表明:PtCTL5基因全长为1026bp,包含732bp的开放阅读框,编码了243个氨基酸组成的蛋白,相对分子质量为26000,为半乳糖结合型凝集素;Blast分析显示,PtCTL5氨基酸序列与克氏原螯虾Procambarus clarkia CTL的一致性最高,为41.84%;系统进化树分析显示,PtCTL5与已发表的三疣梭子蟹的另4种C-型凝集素亲缘关系较远;胚胎及幼体不同发育时期的定量分析表明,PtCTL5在溞状幼体Ⅲ期表达量最高,在胚胎发育的心跳期表达量最低;组织表达分析显示,PtCTL5在血细胞中的表达量最高,肝胰腺中次之;人工注射副溶血弧菌Vibrio parahemolyticus后,PtCTL5在血细胞和肝胰腺中的表达量均于72h时达到峰值;而注射对虾白斑综合征病毒(WSSV)感染后,PtCTL5在血细胞和肝胰腺中的表达量分别于72、12h达到峰值且显著高于对照组(P<0.05)。研究表明,C-型凝集素在三疣梭子蟹先天免疫中具有一定的功能,本研究结果可为进一步解析三疣梭子蟹免疫应答机制提供参考。
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