为筛选对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)具有潜在益生效果的菌株，从体质量为(3.1±0.4)g的健康凡纳滨对虾肠道中筛选出一株具有耐高温(80℃)能力的菌株(命名为RHVJ),采用形态学观察、生理生化鉴定、基因序列比对、病原菌拮抗能力测定、安全性与耐受性分析和生长特性检测等方法对其展开研究。结果表明：菌株RHVJ为革兰氏阳性杆菌，综合其生理生化特征可初步鉴定该菌属于芽孢杆菌属(Bacillus);菌株RHVJ的16S rDNA序列与地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)的MH305331.1和NR074923.1完全匹配，其gyrB序列与CP038186.1和CP023729.1也达到了100%的一致性；综合菌体形态、生理生化及分子生物学特征，判定菌株RHVJ为地衣芽孢杆菌；地衣芽孢杆菌RHVJ可抑制副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)和维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)生长，对凡纳滨对虾无致病性；在胆盐质量浓度为0～1.2g/L、pH为3～11环境下培养，以及在37～90℃下进行5min或15min水浴处理后，菌株RHVJ仍可持续增殖，该菌在27℃、pH7和盐度20条件下生长最佳。研究表明，凡纳滨对虾肠道源地衣芽孢杆菌RHVJ环境适应性良好且安全，具有一定的病原菌拮抗能力，可作为候选菌株开发为益生菌制剂。

为确定黑斑蛙蝌蚪出血病的病原菌并筛选出防治该病的药物，本研究从患出血病蝌蚪体内分离出菌株KD-CXB-1，健康蝌蚪在人工感染该菌后出现与自然感染蝌蚪相似的出血症状。同时从人工感染死亡蝌蚪体内分离到与菌株KD-CXB-1形态特征及生理生化特性一致的优势菌株，以上结果表明KD-CXB-1为黑斑蛙蝌蚪出血病的病原菌。实验进一步对菌株KD-CXB-1开展形态学观察、革兰氏染色、生理生化指标测定、16S rDNA基因序列测定、系统发育树构建、药物敏感性测定。形态学观察显示该菌为杆状的革兰氏阴性菌，长度约1μm，表面粗糙。通过16S rDNA基因序列比对、系统发育树构建、生理生化实验确定KD-CXB-1为嗜水气单胞菌。药物敏感性实验结果表明，KD-CXB-1对氟苯尼考、丁香和苏木等10种药物高度敏感；对乌梅、五倍子和黄芩等3种药物中度敏感；对阿莫西林、大黄和青霉素等8种药物不敏感。研究表明，嗜水气单胞菌是引起黑斑蛙蝌蚪出血病的病原菌，筛选出的10种高敏感药物为有效防治蝌蚪出血病提供了理论参考和实践依据。

为进一步鉴定和体外培养引起养殖海水鱼类和棘皮动物体表溃烂的致病性盾纤毛虫,分别从辽宁地区养殖的患病刺参Apostichopus japonicus、红鳍东方鲀Takifugu rubripes和大菱鲆Scophthalmus maximus的体表分离出3种盾纤毛虫,采用活体观察、甲醛固定观察、扫描电镜观察、醋酸洋红染色及甲基绿派洛宁染色的方法,对3种盾纤毛虫的形态特征进行分析;采用PCR技术获得其18S rDNA基因序列,并与同源序列进行比对及构建系统发育树;选用L-15、MEM和RPMI1640培养基,在相同培养条件下培养7d,比较3种盾纤毛虫种群密度的大小;采用盾纤毛虫最适培养基,在不同的温度(10、15、20、30℃)、盐度(13、20、30、40)、pH(4.2、5.2、7.2、9.2)条件下培养7d,比较3种盾纤毛虫种群密度的大小。结果表明:从刺参和红鳍东方鲀体表分离出的盾纤毛虫形态均与尾丝虫Uronema sp.相似,且18S rDNA序列与尾丝虫的一致性高达99%,在系统发育树上以100%的最高置信度值与尾丝虫聚为一支;从大菱鲆体表分离出的盾纤毛虫形态与伪康纤虫Pseudocohnilembus sp.相似,且18S rDNA序列与伪康纤虫的一致性高达99%,在系统发育树上以100%的最高置信度值与伪康纤虫聚为一支;体外最适培养基筛选结果显示,L-15培养基培养的盾纤毛虫种群密度高于MEM和RPMI1640培养基;体外培养条件试验结果显示,推荐体外培养条件为温度20℃、盐度30、pH 7.2。本研究结果可为海水养殖动物体表溃烂病原盾纤毛虫的分离鉴定及基于盾纤毛虫全虫疫苗研制的体外培养条件优化提供参考。

为诊断中华草龟Chinemys reevesiis腹甲腐皮裂甲病,于江西省南昌市某养龟场采集种龟池患病和濒死的中华草龟种龟11只(编号为1～11号),采用病原菌分离纯化、生理生化试验、疑似病原菌人工回感试验、病原菌药敏试验、组织病理检验等方法进行了病因分析及鉴定。结果表明:该病典型的临床症状为腹甲角质层干裂、骨质层发黑,病龟精神状态均表现呆滞、不爱爬动;病理解剖显示,患病龟肝脏发黑,肺发白,胃肠道无内容物、有腹水,内脏团伴有恶臭味;组织病理观察显示,多数病龟密质骨发生裂解坏死,骨髓腔浸润大量嗜酸性粒细胞,同时内脏组织有炎症特征;进一步从病龟腹甲、肝脏、肺组织分离获得5株菌株,经细菌形态学观察、生理生化试验、16S rDNA基因序列及系统发育分析等鉴定为嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila;人工回感染试验显示,感染龟与自然发病龟的临床症状一致,且在回感中华草龟脏器中再分离到相同的菌株;药敏试验显示,该菌对头孢类、庆大霉素、阿米卡星、卡那霉素、喹诺酮类抗菌药物高度敏感,对青霉素类、四环素抗菌类药物有耐药性。研究表明,中华草龟腐皮裂甲病的病原菌是嗜水气单胞菌,头孢类、庆大霉素、阿米卡星、卡那霉素、喹诺酮类等抗菌药物可作为该病临床防治的首选药品。

以LB培养基为实验基质，从石油污染土里面抽取石油降解菌，完成鉴定，接着开始测定出石油降解率，按照培养温度、时间以及pH值这几个指标对5种石油降解性能良好的菌株，依次完成单因素试验，根据试验结果完成正交试验，从中筛选出降解性能相对良好的菌株，明确菌株降解石油最为理想的条件。实验结果：分离获得的这9种菌株，都表现出卓越的降解性能，5菌属（铜绿假单胞菌、假单胞菌属、苍白杆菌属、博得特氏菌以及戈登氏菌），其最理想的条件归结为：培养温度32℃，pH值7.0，时间20h，石油降解率分别是70.12%、76.42%、75.66%、77.50%还有73.22%。

[目的]对能力验证样品（乳粉)中的沙门氏菌分离鉴定过程进行分析总结。[方法]按照能力验证的项目指导书，根据国家安全标准《食品微生物学检验沙门氏菌检验》GB4789.4-2016进行定性检测，所使用的生化鉴定仪器为ATB全自动微生物鉴定系统。[结果]本次能力验证，样品有2个，共分离出三种菌株，其中一个样品检出目标菌沙门氏菌和干扰菌大肠埃希氏菌，一个样品检出目标菌弗劳地柠檬酸杆菌。【结论】本次能力验证项目对本实验室在乳粉中沙门氏菌的检测结果的一致性方面和检测能力及检测水平方面给予评价为满意。本实验室具备检测食品中的沙门氏菌的技术能力。