文章-世纪中文出版社

dCas9-gRNA在卡介苗侵染小鼠巨噬细胞过程中对rab7的调控作用下载：71 浏览：483

郭越杨文淇关松磊《生物技术研究》 2020年3期

摘要:

分析rab7及其下游相关分子rilp和rep1在卡介苗侵袭巨噬细胞过程中的作用。[方法]利用CRISPRERA在线设计鼠源rab7-gRNA序列,构建dCas9调控质粒,比较调控前后rab7、rilp和rep1的mRNA表达量。[结果]成功设计3条rab7-gRNA,构建重组调控质粒p X330S-2-d Cas9-gRNA-T2A-EGFP; BCG感染后,巨噬细胞内rab7及其下游的rilp和rep1的mRNA水平明显上升(P <0. 01); gRNA1调控后,rab7及下游rilp的mRNA水平明显下降(P <0. 05; P <0. 01); gRNA3调控后,rab7及rilp mRNA水平有所下降,但无统计学意义(P> 0. 05)。gRNA1和gRNA3调控对rep1 mRNA水平无明显影响(P> 0. 05)。[结论]在BCG侵染巨噬细胞过程中,rab7作为晚期吞噬体的标志受到dCas9调控后变化明显,rilp作为rab7的下游效应分子,表达水平与rab7的变化一致,而rep1未见明显变化。三者在MTB寄生过程中的作用还有待深入研究。

miR-17-5p靶向信号调节基因SIRPα调控巨噬细胞抗结核分枝杆菌的炎症反应下载：82 浏览：488

张帆1 何萌1 李元1 王淑娥1 洪丹彤1 王雅蓉1 刘宏鹏1 姜中佳1 安维军2 郭乐3,1 《生物技术研究》 2020年3期

摘要:

验证miR-17-5p对TLRs负向调控因子SIRPα的靶向性,探讨其对抗结核分枝杆菌(MTB)炎症反应的调控作用。[方法]利用生物信息学预测miR-17-5p对SIRPα的靶向性,构建SIRPα野生型和突变型报告载体,利用双荧光素酶报告法、Western Blot、激光共聚焦等技术验证miR-17-5p对SIRPα的靶向性;通过H37Ra感染THP-1巨噬细胞,用miR-17-5p mimics及其inhibitor处理细胞。利用Q-PCR检测H37Ra感染后miR-17-5p的表达;通过免疫荧光、Western Blot和ELISA等技术检测SIRPα和细胞因子TNF-α的表达情况。[结果]H37Ra感染可下调miR-17-5p表达,且随感染复数的增加,下调表达愈加显著;荧光素酶报告法、Western Blot等结果证实miR-17-5p可靶向结合SIRPα3’-UTR,下调SIRPα的表达,进而上调细胞因子TNF-α的表达。[结论]MTB可下调miR-17-5p表达,而miR-17-5p可靶向抑制SIRPα的表达,从而调控巨噬细胞抗MTB的炎症反应。

结核病阳性血清特异结合蛋白的筛选与鉴定下载：81 浏览：494

易小妹1,2 王丽1 罗丹1 王忠刚3 李玲玲1 廖雅婷1 曾焱华1 《生物技术研究》 2019年8期

摘要:

从T7噬菌体展示的结核分枝杆菌基因组DNA文库中筛选结核病阳性血清特异结合蛋白。[方法]以饱和硫酸铵法初步纯化的结核病阳性血清为靶分子,对结核分枝杆菌基因组DNA文库进行3轮生物淘选; PCR扩增阳性噬菌体的外源DNA片段,测序后进行BLAST分析;间接ELISA和斑点免疫印迹试验检测阳性噬菌体与结核病阳性血清能否特异结合。[结果]经过3轮生物淘选,与结核病阳性血清特异结合的噬菌体得到明显富集; BLAST结果表明随机挑取的19个阳性噬菌体包括4种不同的序列,其中编码核糖激酶的序列出现次数最多;这些代表性噬菌体均能与结核病阳性血清特异结合。[结论]成功筛选到能与结核病阳性血清特异结合的4种蛋白,其中核糖激酶可能为与结核病阳性血清特异结合的优势抗原。

2014-2017年三亚市涂阳肺结核患者耐药监测结果分析下载：66 浏览：468

林永通黎永华黄隆李朝勇《预防医学杂志》 2019年4期

摘要:

目的通过耐药监测了解三亚市涂阳肺结核患者的耐药状况,为三亚市结核病防治提供参考依据。方法收集三亚市2014年1月-2017年12月期间新登记活动肺结核患者中获得的602例涂阳肺结核患者的临床分离株,进行菌型鉴定,并采用WHO《结核病药物耐药性监测指南》推荐的比例法对分离菌株进行6种抗结核药物[利福平(RFP)、异烟肼(INH)、链霉素(Sm)、乙胺丁醇(EMB)、氧氟沙星(Ofx)、卡那霉素(Km)]的药物敏感性试验。对各种药物的初始耐药率、获得性耐药率、耐多药率、耐药顺位的差异进行分析。结果分离的602株菌株经菌型鉴定,共有结核分枝杆菌592株,总体耐药率为22. 97%(136/592),总耐多药率为5. 57%(33/592)。获得性耐药率41. 67%(40/96)高于初始耐药率19. 35%(96/496),差异有统计学意义(χ2=22. 27,P <0. 01)。6种药物耐药率顺位由高到低依次为Sm12. 67%(75/592)、INH 9. 46%(56/592)、RFP 8. 95%(53/592)、Ofx 5. 57%(33/592)、EMB 2. 20%(13/592)、Km2. 03%(12/592)。6种药物共出现22种不同耐药谱。不同性别、年龄组的耐药率差异无统计学意义。结论三亚市结核病患者总体耐药水平相对较低,仍需继续加强对本市结核病患者的耐药性监测。

绍兴地区非结核分枝杆菌肺部感染情况分析下载：88 浏览：503

赵金云金法祥许文芳许鹏童丹《国际检验医学》 2020年7期

摘要:

目的了解绍兴地区由非结核分枝杆菌(NTM)所引起的肺部感染情况及细菌耐药状况，为临床合理用药提供参考。方法收集2017年7月—2018年7月分离自绍兴文理学院附属医院及各县区医院临床样本的NTM，并分析患者临床资料。采用对硝基苯甲酸培养基和噻吩-2-羧酸肼培养基对菌株进行初步鉴定，并用基因芯片技术进一步进行分型。采用比例法进行药物敏感性试验。结果 2 768例样本中共分离出NTM 243株，检出率为8.77%。NTM感染患者中男性占77.37%，<60岁者占65.43%，约70.00%的患者同时患有其他肺部疾病。243株NTM主要为胞内分枝杆菌(62.14%)，其次为鸟分枝杆菌(19.75%)。分离出的NTM对一线抗菌药物的耐药率均较高，对异烟肼和链霉素的耐药率近100.00%；对二线抗菌药物的耐药率低于一线抗菌药物。结论 NTM感染引起的肺部疾病好发于患有其他肺部疾病的患者，胞内分枝杆菌是临床主要的NTM，快速、准确地进行菌种鉴定有助于临床对患者进行早期诊断和治疗。

不同检测方法快速诊断结核性胸膜炎临床评价下载：85 浏览：484

申洁贾莉董小帅孟程《国际检验医学》 2019年9期

摘要:

目的探讨几种检测方法对结核性胸膜炎的诊断价值，以寻找更好的结核性胸膜炎快速诊断方法。方法选取50例渗出性胸腔积液未确诊患者，进行经胸腔镜壁层胸膜活检。对胸腔积液和胸膜活检样本进行细菌培养、聚合酶链反应(PCR)、病理组织学等显微镜检查(直接和细胞离心后)。对分离自胸腔积液的单核细胞进行T细胞斑点试验。结果胸膜活检样本结核分枝杆菌阳性率高于胸腔积液样本。胸腔积液和胸膜活检样本经细胞离心处理后，敏感性分别提高到20.0%和37.5%。T细胞斑点试验敏感性(98.6%)和特异性(95.6%)较好。结论胸膜活检样本的微生物学检查与病理组织学检查相结合是诊断结核性胸膜炎的最佳方法；胸膜活检样本的微生物学检查比胸腔积液样本有更高的阳性率；T细胞斑点试验作为辅助诊断结核性胸膜炎的方法值得在临床推广。

基因芯片技术在分枝杆菌菌种鉴定和耐药性分析中的应用下载：94 浏览：499

李丹1 杜德兵1 吴文燕1 王德成2 《国际检验医学》 2019年5期

摘要:

目的探讨基因芯片技术在分枝杆菌菌种鉴定和耐药性分析中的应用价值。方法收集2014年1月—2016年12月宜昌市第三人民医院抗酸染色镜检阳性的肺结核患者痰样本680例，同时采用基因芯片法和培养法进行菌种鉴定，对被鉴定为结核分枝杆菌(MTB)复合群的样本分别再采用以上2种方法检测MTB对利福平和异烟肼的耐药性。以培养法作为参考方法，评价基因芯片法菌种鉴定的符合率。以药物敏感性试验结果为金标准，计算基因芯片法MTB耐药检测的敏感性、特异性和符合率，并比较其与金标准的一致性。结果基因芯片法检出31例非结核分枝杆菌(NTM)，培养法检出32例NTM，符合率为96.88%。与药物敏感性试验相比，基因芯片法检测MTB对利福平耐药性的敏感性为89.81%，特异性为93.55%，符合率为92.80%，Kappa值为0.82，P>0.05；检测MTB对异烟肼耐药性的敏感性为83.06%，特异性为91.39%，符合率为89.48%，Kappa值为0.73，P>0.05。结论基因芯片法能够准确地筛选出NTM，在结核病诊断和耐药监测中敏感性和特异性较高，与传统培养法及药物敏感性试验有很好的一致性，且更高效、快捷、安全，具有较大的应用价值。

结核分枝杆菌检验在临床医学中的意义和应用下载：71 浏览：480

牟程旭《临床医学杂志》 2025年2期

摘要:

目的：探讨并分析结核分枝杆菌在临床医学中的检验意义和应用。方法以100例病例为研究对象，分为实验组与参照组，各50例。测定并比较两组痰液中的结核分枝杆菌检出率；同步对两组外周血中免疫分子肿瘤细胞因子-ɑ（g/L）、白细胞介素-2（g/L）、干扰素-Ƴ（g/L）的检验值进行分析并探讨其与结核分枝杆菌的相关性。结果实验组的结核分枝杆菌检出率为30.00%，显著高于参照组的2.00%，差异统计学有意义（X2=14.5883，P=0.0083）。同时，实验组中三类免疫分子的浓度均显著高于参照组（t值分别为43.8483、35.1883、30.6783，P值均为0.0083），表明与结核分枝杆菌阳性检出率有密切关联。结论：结核分枝杆菌的检出不仅对于结核病的诊断具有重要意义，而且与免疫分子水平体现了高度的相关性，可用于评估疾病进程和预后，对于临床医学具有重要应用价值。

实验室检测结核分枝杆菌对吡嗪酰胺耐药性的方法学评价下载：87 浏览：511

张阳奕江渊武洁王莉莉郁晨蕾李静《国际检验医学》 2018年10期

摘要:

目的评估MGIT 960药物敏感性检测法、吡嗪酰胺酶(PZase)活性检测法和pncA基因序列分析法在检测结核分枝杆菌对吡嗪酰胺(PZA)耐药性中的应用价值。方法应用上述3种方法对上海市疾病预防控制中心2014年收集的207株结核分枝杆菌临床分离菌株进行PZA耐药性检测，比较3种方法的耐药性检测结果。结果在207株结核分枝杆菌对PZA的耐药性检测结果中有38株菌3种方法检测结果不一致，对其进行重复性试验，结果显示13株MGIT 960药物敏感性检测法结果为耐药的菌株重复性试验有10株转为敏感，且这10株菌株pncA基因序列分析结果均为敏感。以3种方法结果完全一致或2种方法结果一致的PZA耐药性检测结果为参考结果，MGIT 960药物敏感性检测法、PZase活性检测法和pncA基因序列分析法的敏感性分别为94.8%、100.0%和94.8%，特异性分别为93.3%、83.9%和98.0%。与参考结果的一致性Kappa值分别为0.85、0.74和0.93。结论 MGIT 960药物敏感性检测法和pncA基因序列分析法在检测结核分枝杆菌对PZA的耐药性上具有较好的一致性。MGIT960药物敏感性检测法存在假阳性，建议对MGIT 960药物敏感性检测法检测PZA耐药的样本进行pncA基因序列分析，若二者结果不符则进行MGIT 960药物敏感性重复性试验，以提高PZA耐药性检测的准确性。

陕西省87株耐药结核分枝杆菌寡核苷酸基因分型和耐药性分析下载：94 浏览：506

李妍1 曾小红2 杨健1 王蕊1 鲜小萍1 张天华1 《预防医学杂志》 2018年10期

摘要:

目的对陕西87例耐药结核分枝杆菌进行分型研究,了解不同基因型在陕西的流行情况及耐药相关性。方法收集陕西省结核分枝杆菌耐药菌株87株,采用Spoligotyping方法对结核分枝杆菌临床分离株进行基因分型。结果 87株耐药结核分枝杆菌中北京家族占86.21%(75/87),非北京家族占13.79%(12/87);非北京基因型中,T家族(T1、T2、T2-3、T3)占9.20%(8/87),Manu家族占1.15%(1/87),新发现基因型占3.45%(3/87)。北京家族和非北京家族的单耐药、多耐药、耐多药、其他类型耐药比率分别为38.67%(29/75)、13.33%(10/75)、42.67%(32/75)、5.33%(4/75)和66.67%(6/9)、11.11%(1/9)、22.22%(2/9)、0.00(0/3),差异均无统计学意义(P>0.05)。结论陕西省结核分枝杆菌呈基因多态性,其主要流行基因型为北京家族;北京家族和非北京家族的耐药性差异无统计学意义。

积液细胞学检验与ADA、T-SPOT.TB、Xpert MTB/RIF检测在结核性胸膜炎诊断中的价值对比研究下载：31 浏览：1030

吴雯晶1 伊芃芃2 吴佗2 《国际检验医学》 2025年4期

摘要:

探讨积液细胞学检验在结核性胸膜炎诊断中的临床意义及其与ADA、T-SPOT.TB、Xpert MTB/RIF检测项目联合诊断的应用价值。方法：选取2021年3月至2022年10月就诊于济宁市公共卫生医疗中心的胸腔积液临床病例100例（其中实验组53例，对照组47例），分别进行积液细胞学、ADA、T-SPOT.TB、Xpert MTB/RIF检查，分析组间统计学差异、项目间相关性，绘制ROC曲线并通过Logistic二元回归建立临床预测模型。结果：组间ADA及各类细胞百分比均有显著性差异（p＜0.05），淋巴细胞百分比与ADA、T-SPOT.TB、Xpert MTB/RIF检测结果均显著相关，最终纳入Logistic回归模型的指标包括：积液淋巴细胞百分比和ADA，该模型检测ROC曲线下面积为0.915 [95%CI (0.859~0.971)]，敏感度86.8%，特异度83.0%，均高于单项检测。结论：积液细胞学检验尤其是淋巴细胞百分比升高对结核性胸膜炎的临床诊断有重要的提示意义，应用其与ADA建立回归模型对结核性胸膜炎进行预测具有较高准确性，尤其适用于基层医疗机构。

延续护理干预对NTM肺病患者医嘱依从性及生活质量的影响下载：121 浏览：1378

陈燕霞冯翠莲黄丽萍胡佩仪吴色勋《中国医学研究》 2023年12期

摘要:

目的探讨延续护理干预对NTM肺病患者医嘱依从性及生活质量的影响。方法选取2021年8月至2022年6月在我院接受治疗的142例NTM肺病患者按单双号分组方式将其分为对照组和研究组，对照组采用常规护理，研究组在常规护理基础上实施延续护理，对比两组护理干预效果。结果实施延续护理后研究组医嘱依从性高于对照组，P＜0.05有统计学意义。比较2组生活质量干预前2组比较差异无统计学意义P＞0.05，干预3个月后研究组高于对照组，P＜0.05，具有统计学意义。结论通过对NTM肺病患者实施延续护理，能显著改善患者医嘱依从性，提高其生活质量。

肺结核患者痰中结核分枝杆菌检验的价值和安全性评价下载：137 浏览：1491

仁雪江《医学研究前沿》 2022年12期

摘要:

探究肺结核患者痰中结核分枝杆菌检验的价值和安全性。方法：选择我院自2020年9月-2021年9月收治的100例肺结核患者，根据患者是否为活性肺结核分为参照组（50例，非活性肺结核）和研究组（50例，活性肺结核），对两组患者分别进行痰中结核分枝杆菌检验，并对比两组结核分枝杆菌分型结果。结果：研究数据表明，研究组阳性率明显高于参照组。差异有统计学意义（P＜0.05）。研究组药敏型菌种率与参照组比较无显著差异。差异不具有统计学意义（P<0.05）。结论：结核分枝杆菌检验对肺结核患者的诊断与治疗具有较高的临床价值，能够有效的提供阳性检测率，值得进一步的推广使用。

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