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二倍体泥鳅与大鳞副泥鳅及杂交F1精子结构与活力 下载：79 浏览：456

李猛 虞炯莹 王卫民 《水产研究进展》 2022年2期

摘要:
二倍体泥鳅与大鳞副泥鳅杂交能够顺利获得杂交后代，其正反交核型都为（2n=49），但杂交后代精巢表现出明显的发育迟缓现象，杂交泥鳅自交与回交实验表明，其雄性不可育。为了解二倍体泥鳅和大鳞副泥鳅杂交F1雄性不育的原因，实验通过计算机辅助精子活力分析系统（CASA）、光学显微镜、扫描电镜、透射电镜、流式细胞技术分别对二倍体泥鳅（DD）、大鳞副泥鳅（PP）、其正反杂交F1（DP）和（PD） 4种泥鳅精子的形态结构与活力进行了分析。结果显示，激活30 s时，DD和PP的精子运动率分别为76.50%±0.70%和75.17%±8.60%，极显著高于DP （3.65%±1.75%）和PD （2.68%±0.63%），且杂交泥鳅的精子的平均运动速度（VAP）、平均曲线速度（VCL）、平均直线运动速度（VSL）等运动参数也极显著低于DD和PP，说明杂交泥鳅精子的活力极其低下。应用流式细胞技术对4种泥鳅精巢内细胞进行倍性鉴定，发现DD和PP精巢内大多为1N精子，而DP和PD精巢内除了正常单倍体精子外，还有大量的2N和4N以及少量的8N细胞。通过扫描电镜和透射电镜发现，DD与PP精巢内精子细胞致密、结构完整、大小均匀，其全长分别为（33.71±2.12）和（34.28±1.83）μm。而DP和PD精巢内的精子其头长显著高于DD和PP的精子，其尾长、中片长和全长皆显著低于DD和PP的精子。研究表明，杂交泥鳅的精子与正常精子相比，在精子形态和内部DNA含量方面表现出明显多态性。这可能是造成杂交泥鳅雄性不育的原因。杂交泥鳅中出现了大量的异常精子，如多尾精子、双核精子以及大头精子，根据测量，其头部大小也表现出明显的多态性，根据头部体积大小测量估算其倍性，其中有正常的精子即单倍体精子，同时有二倍体精子、四倍体精子、八倍体精子甚至更高倍性的精子。这些杂交泥鳅的异常精子为其精子活力低下以及雄性不育提供了重要证据。

图像流式细胞仪在中华绒螯蟹血细胞分群及吞噬功能研究中的应用 下载：92 浏览：457

胡锦丽1 任星潮1 刘逸尘1 孙金生1 耿绪云2 张亦陈1 《水产研究进展》 2019年6期

摘要:
为了更精确地对甲壳动物血细胞进行快速分类和功能分析，本研究以中华绒螯蟹为例，依据其血细胞内具有颗粒结构的特征，与常规显微观察对比，探讨了一种基于图像流式细胞仪的血细胞自动化分类新方法，并测量了体质量为(10±3) g的中华绒螯蟹的血细胞对直径1μm微球的吞噬情况。结果显示，两种方法都可将中华绒螯蟹血细胞分为4个类群。显微镜观察分类基于胞内可见颗粒，但由于缺乏精细的量化标准，批次样品的人工辨识结果波动较大；而图像流式方法以胞内全部颗粒结构为对象，利用高精度检测模块测量，结果更准确、客观，而且通量高、重复性好。测量结果显示，中华绒螯蟹血淋巴中无颗粒、小颗粒、中颗粒及大颗粒细胞占比分别为40.62%±2.65%、36.68%±6.84%、7.80%±1.16%和16.51%±5.60%，依据测量的颗粒特征区分的4个类群界限清晰，缺乏过渡样点，提示各类细胞之间可能没有相互转化。进一步的活体微球吞噬实验证实，中华绒螯蟹的4类血细胞都具有吞噬功能，并以无颗粒细胞为主要吞噬类群；吞噬微球的细胞比例在注射后6 h内呈钟型曲线变化，4 h可达峰值(5.69%±0.44%)，表明中华绒螯蟹血细胞能高效清除血淋巴中的异物。研究表明，图像流式细胞仪适合于中华绒螯蟹的血细胞分类分析和功能研究，本研究结果为同类研究提供了重要参考，将有助于更全面了解甲壳动物血细胞的功能。

三角褐指藻滤液提取物对东海原甲藻和盐藻生理特性的影响 下载：53 浏览：427

薛峤娜1 王蕊2 谭丽菊1 王江涛1 《海洋研究》 2018年4期

摘要:
在实验室培养条件下,利用流式细胞仪从细胞生长、细胞大小、细胞膜完整性、酯酶活性等方面分别研究了三角褐指藻(Phaeodactylum triconutum)滤液提取物对东海原甲藻(Prorocentrum donghaiense)和盐藻(Dunaliella salina)为期6d生物培养过程中生理特性的影响。结果表明,三角褐指藻滤液乙酸乙酯提取物对东海原甲藻表现出强烈的生长抑制作用,荧光检测显示,其能刺激细胞体积的增大,导致部分藻体细胞膜受损,酯酶活性在短时间内增强,随后受到显著抑制。而提取物对盐藻的生长抑制并不明显,盐藻细胞体积没有受到影响,细胞膜保持了高度完整,酯酶活性在第6天时才受到抑制作用。以上分析表明,东海原甲藻对三角褐指藻滤液乙酸乙酯提取物更加敏感,特殊的细胞内部结构特征有利于化感物质进入东海原甲藻的体内,直接导致藻细胞的死亡。化感物质引起的不同的生理响应中,酯酶活性指标具有更好的敏感性,是在环境压力下生物自我保护的一种应急方式。

多模石英光纤在流式细胞仪中的应用 下载：243 浏览：3265

张俊 钱志康 殷志东 李辉 《光电子进展》 2023年7期

摘要:
随着光纤光学的发展与成熟，光纤作为光路引导元件应用到流式细胞仪中，本文从流式细胞仪的原理出发，讨论石英多模光纤作为光路引导元件在流式细胞仪中的作用机制，并介绍了相关的应用实例。
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