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NDV-HN致人肺腺癌A549细胞凋亡的实验研究 下载:73 浏览:441

田雯钰 林宇宁 梁莹 黄娟娟 李瑞 樊晓晖 《肿瘤研究》 2020年6期

摘要:
[目的]探讨NDV-HN诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的相关机制。[方法](1)构建包含绿色荧光素蛋白(GFP)及NDV-HN的慢病毒sfGFP-HN载体,用293V细胞包装慢病毒LvsfGFP-HN,用293V细胞进行空载质粒转染组(空载组)慢病毒包装,命名为Lv-sfGFP;(2)以空载组A549-sfGFP细胞和空白组A549为对照,用慢病毒转染方法建立稳定表达NDV-HN蛋白的A549细胞株,即A549-sfGFP-HN细胞株,RT-PCR、Western blot检测A549细胞NDVHN蛋白的表达;(3)分别在A549-sfGFP-HN和A549两组细胞中加入顺铂,流式细胞术检测细胞凋亡;(4)在基因水平和蛋白水平上分别用RT-PCR和Western blot检测各组细胞凋亡相关蛋白Bcl-2的表达。[结果](1)Lv-sfGFP-HN和Lv-sfGFP慢病毒分别转染A549细胞后,只在转染组A549-sfGFP-HN细胞检测到NDV-HN蛋白。(2)转染组A549-sfGFP-HN细胞凋亡率明显高于空白组A549细胞(P<0.01),转染组A549-sfGFP-HN细胞加入顺铂后,其细胞凋亡率明显增加。(3)转染组A549-sfGFP-HN细胞与空载质粒转染组A549细胞和空白组A549细胞相比,凋亡相关蛋白Bcl-2表达量明显下调(P<0.01)。[结论]慢病毒转染NDV-HN到A549细胞后导致A549-sfGFP-HN细胞出现凋亡,且与Bcl-2下调有关。转染NDV-HN的肺癌细胞联合使用抗癌药物顺铂,增加了肺癌细胞凋亡率。

基于数据挖掘探讨小儿疫病组方用药规律 下载:56 浏览:364

季小钰1 柳莺南1 宋安然1 阎兆君2 《中国儿科杂志》 2020年10期

摘要:
目的运用数据挖掘技术探讨温病古籍中治疗小儿疫病的组方及用药规律。方法检索查阅温病古籍,选取治疗小儿疫病的方剂纳入Excel数据库,运用SPSS 25.0与SPSS Modeler 18.0软件分别进行描述性分析、聚类分析、因子分析及关联分析。结果本研究共纳入41首方剂、药物138味。治疗小儿疫病内服方剂中使用频数≥3次的38味药物,居前6位的依次是甘草、黄芩、麻黄、麝香、白芍、朱砂,药性以寒凉为主,药味以辛、苦、甘为主,归经以肺、脾、胃、心、肝为主,按药物功效分为13类,以清热药、解表药、补虚药为主。外用方剂中使用频次≥2次的药物有升麻、甘草、大黄、黄柏。关联分析与聚类分析共得到26条关联规则、4个聚类方,因子分析不理想。结论通过研究整理温病古籍,分析认为治疗小儿疫病以清热解表、宣降肺气为主,兼顾益气健脾,传变入里者佐以息风安神,用药多选用寒凉药物以及辛散之品,结果与中医学理论及现代药理学研究相契合,以期为小儿疫病不同发病阶段选方用药提供参考和借鉴。

猪丹毒丝菌SpaA蛋白的表达与纯化 下载:73 浏览:483

刘博婷1 李肇高1 严舒焕1 李荣君1 蔡巩林1 林锦铨1 彭凌1,2 《生物技术研究》 2020年3期

摘要:
在大肠杆菌中表达猪丹毒丝菌spaA基因并纯化重组蛋白。[方法]利用PCR扩增猪丹毒丝菌临床分离株spaA基因,构建重组质粒p GEX-4T-1-spaA,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达融合蛋白GST-SpaA,并优化表达条件。最后采用GST琼脂糖纯化树脂纯化,SDS-PAGE和Western Blotting检测。[结果]成功扩增spaA基因,获得重组表达菌株BL21(DE3)/p GEX-4T-1-spaA;在菌体OD600为0. 9时,加入IPTG至终浓度0. 1 mmol/L,34℃诱导6 h的条件下表达效果最好。经SDS-PAGE检测和纯化后得到大小为97 kDa的GST-SpaA; Western Blotting检测结果表明,GST-SpaA具有良好的免疫原性。[结论]成功在大肠杆菌中表达了SpaA蛋白,经纯化得到具有免疫原性的重组蛋白,为后续研制猪丹毒丝菌SpaA蛋白亚单位疫苗奠定基础。

大型奶牛场临床型乳房炎发病特征调查 下载:22 浏览:444

钱坤1 李秀梅2 田向学3 《当代畜牧兽医》 2020年12期

摘要:
归纳中国大型奶牛场临床型乳房炎发病特点,进而为疾病防治工作的开展提供重要参照依据。鉴于此,本次试验研究中采集了国内5个不同省份15个大型奶牛场20000条与临床型乳房炎发病相关的数据进行分析,发现国内大型奶牛场临床型乳房炎在分娩后短期中发病率相对较高,症状表现以局部较为常见,后乳区发病率较高于前乳区。希望本次试验研究结果能为牛乳房炎防治方案的拟定提供重要参照信息。

仔猪黄白痢病防治措施 下载:23 浏览:436

李天仇 王国贵 胡联胜 《当代畜牧兽医》 2020年12期

摘要:
仔猪哺乳期极易发生黄白痢病,常伴随剧烈腹泻等症状,严重时会造成大批量仔猪死亡。本文介绍了仔猪黄白痢临床症状,并提出仔猪黄白痢病综合防治以及药物防治措施,旨在提升猪场整体防治疾病的效果及经济效益。

农村动物疫病防控现状及科学防控策略 下载:32 浏览:435

勾友明 《当代畜牧兽医》 2020年12期

摘要:
在我国社会经济不断发展的背景下,农村动物养殖也得到了巨大的发展机遇,在快速发展过程中暴露出了疾病防控的弊端,这些弊端以及不足之处不仅严重影响了动物养殖的可持续发展,同时还在一定程度上影响了社会的稳定发展,因此对动物疾病防控工作的研究具有重要的现实意义。本文主要分析了农村动物疫病防控的现状,探讨了科学的防控策略。

规模化养殖肉牛的疫病防控对策 下载:32 浏览:353

李艳山 《当代畜牧兽医》 2020年11期

摘要:
我国畜牧业在深入发展的过程中,重视引进规范化管理经验,尤其是肉牛规模化养殖,有效提升了经济效益。本文围绕规模化养殖中肉牛常见的疫病,结合实际工作经验,探析疫病防控对策,供相关人员以参考。

加强管理与动物疫病防控探析 下载:18 浏览:416

石洪春 《当代畜牧兽医》 2020年11期

摘要:
加强乡村兽医和村级动物防疫员管理与动物疫病防控工作成为当前工作的重点,已经得到了社会的广泛关注。本文将围绕其创新动物防疫员管理与动物疫病防控进行阐述,旨在为日后研究工作的顺利进行奠定基础。

家禽防疫工作中存在的问题及对策 下载:20 浏览:382

张海燕 《当代畜牧兽医》 2020年10期

摘要:
家禽养殖中若有疫病就会严重威胁养殖的安全,但是家禽疫病的传染源较多,所以养殖的防疫工作就必须得到相应的重视,做好防疫就是养殖户保证自身养殖效益的必经之路。本文就是在此基础上,结合当前我国家禽防疫的现状,浅谈如何做好家禽的防疫工作,并给出了参考性的建议。

NF-κB1基因干扰质粒的构建及其对DEV增殖的影响 下载:76 浏览:487

贺欣薇1 郑敏2 胡安东1 杨颖3,4 周碧君3,4 程振涛3,4 文明3,4 《生物技术研究》 2019年6期

摘要:
探究NF-κB对DEV增殖是否有影响。[方法]以NF-κB1基因作为靶基因,设计并构建4个不同p GPU6/GFP/Neo shRNA表达载体,通过荧光显微镜法观察转染后细胞荧光密度和RT-PCR检测转染细胞NF-κB1基因转录水平以筛选最佳干扰质粒,分3种不同组别进行干扰实验后,以荧光定量PCR法检测DEV-NP基因表达变化。[结果]所构建的重组质粒p GPU6/GFP/Neo-NF-κB1-2对细胞NF-κB1基因的干扰效率最高,可达78. 77%;除先感染后干扰组对DEV增殖影响不大外,先干扰后感染组与同时感染和干扰组均对DEV增殖呈现出一定的抑制作用,其中先干扰后感染组在第72 h时的沉默效率最高,可达78%,而同时感染和干扰组于第48 h时的沉默效率最高,可达82%。[结论]RNA干扰下调NF-κB1基因会抑制DEV增殖。

小反刍兽疫疫病的监测与防控 下载:32 浏览:373

吴丹 刘冬冬 张夏萍 李伟 马晓媛 《当代畜牧兽医》 2020年8期

摘要:
小反刍兽疫疫病属于急性病毒性传染病,发病率、死亡率都非常高。因此,本文多层次客观探讨了小反刍兽疫疫病的监测以及防控,在合理化防控基础上确保羊只健康生长。

如何做好生猪疫病防治工作 下载:20 浏览:334

崔茂涛 《当代畜牧兽医》 2020年7期

摘要:
本文主要针对做好生猪疫病防治工作展开深入研究,先对生猪疫病的原因予以简要分析,然后重点提出了几点防治措施,比如创建良好的生猪生长环境、制定有效的生猪养殖方法、制定完善的消毒制度、确保疫苗和药物使用的合理性等,不断提高生猪疫病防治工作水平,使生猪质量得以保证。

抗体检测技术在动物疫病防控中的应用 下载:15 浏览:416

侯长娟 《当代畜牧兽医》 2020年7期

摘要:
人与自然和谐相处的重要内容之一就是人与动物的和谐相处。在我国经济发展的过程中,畜牧业发展起着重要的作用,是国民经济的重要组成部分。但是,随着生态环境的恶化,动物疫病问题不断出现,同时表现出不同的特点,如疫病的严重性、病源的多样性和复杂性等,病原感染形式由单一感染转化为多重感染和并发感染的特点。一旦动物发生疫病,不仅危害动物的健康,同时也威胁到人类的安全。因此,对动物疫病进行防控和检疫工作非常重要。随着生态环境的恶化,病原感染形式由单一感染转化为多重感染和并发感染的特点,因此抗体检测技术的应用非常的重要。本文主要阐述了抗体检测技术在动物疫病防控工作中的具体应用。

蛋鸡疫病综合防控技术的研究 下载:20 浏览:417

赫伟 《当代畜牧兽医》 2020年7期

摘要:
以蛋鸡疫病防控为研究对象,依托工作经验,对蛋鸡规模化养殖下疫病综合防治技术进行了简要分析,以提升蛋鸡饲养疫病综合防控质量,促进蛋鸡养殖业稳定与健康发展。

猪常见疾病的防控措施 下载:12 浏览:369

李丛鸽 《当代畜牧兽医》 2020年7期

摘要:
提升对猪疾病的重视力度,能够保障养殖场中猪的存活率。本文对常见的猪疾病进行分析,通过猪气喘病、猪丹毒治疗等方面做以深入探讨,希望能为相关人士提供有效参考。

规模化蛋鸡场疫病防控要点分析 下载:385 浏览:394

木沙·艾木都拉 《当代畜牧兽医》 2020年6期

摘要:
本文以硕县蛋鸡场为例,分析养殖中在制度、队伍、免疫程序等方面存在问题,并提出有效措施,力求科学选址和布局、健全疫病防疫体系、保障疫苗质量、完善免疫程序等方式,使疫病防控效果得到显著提升。

生猪疫病防控存在的问题及对策 下载:20 浏览:395

黄照睿 《当代畜牧兽医》 2020年6期

摘要:
自我国养猪业发展以来,疫病问题时有发生,无法做到有效根除,这给人们的身体健康以及财产安全埋下了较大隐患。本文针对生猪疫病防控存在的问题,提出了几点有效对策,以供相关研究参考。

菌蜕搭载的埃博霉素促进Caspase-3介导的HeLa细胞凋亡 下载:84 浏览:502

祝文兴1 秦春晶2 刘新利1 张玉玉3 《生物技术研究》 2018年11期

摘要:
初步探讨菌蜕搭载的埃博霉素抑制HeLa细胞增殖的机制。[方法]用半抑制浓度的游离或菌蜕搭载的埃博霉素B分别处理HeLa细胞4~48 h,应用凋亡检测试剂盒分析细胞凋亡情况,应用Caspase-3分析试剂盒检测Caspase-3的活性,并用透射电镜观察细胞的形态变化。[结果]菌蜕搭载的埃博霉素B能更快地诱导HeLa细胞发生时间依赖的凋亡和坏死,处理24 h时早期凋亡细胞及晚期凋亡和坏死细胞的比例分别达32.72%和18.36%,处理48 h时比例分别达23.14%和51.52%。该药物还能诱导更强的Caspase-3激活,处理24 h时其活性约为游离埃博霉素B的1.5倍。Caspase-3活性的升高程度与细胞的早期凋亡程度相平行。该药物处理的HeLa细胞显示典型的凋亡特征。[结论]菌蜕搭载的埃博霉素B能更有效地促进Caspase-3介导的HeLa细胞凋亡。

高热症状疫病在牛养殖中的诊断和防治 下载:22 浏览:397

郑俊 李沅峰 《当代畜牧兽医》 2019年12期

摘要:
传染病对牛养殖业的危害比较大,不仅影响牛产业的健康发展,同时对养殖业的影响也比较大。本文阐述的内容是高热病在牛养殖业中的诊断和防治。该种疾病具有一定的特点,即发病高、流行广、传播快等。在比较短的时间内能够造成严重的影响,进而个养牛产业带来影响。

猪丹毒的检疫与诊治 下载:22 浏览:395

翟云娇 《当代畜牧兽医》 2019年12期

摘要:
随着社会经济的发展以及人们生活水平的不断提高,猪肉市场的需求量越来越高,而当前养殖规模的不断扩大在满足市场需求的同时也暴露出众多的问题,疫病流行,传播速度也快,影响猪肉质量的同时也对人们的身体健康造成了影响。其中,猪丹毒是一种极易发生暴发性流行的疫病,患病后的猪只死亡率较高,给养猪行业造成重大的经济损失。基于此,本文就猪丹毒的检疫与诊治进行了分析。
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